簡(jiǎn)介：中圖分類號(hào)密級(jí)中毒性表皮壞死癥合并新型布尼亞病毒感染1例并文獻(xiàn)復(fù)習(xí)熊瑛計(jì)學(xué)位論文29頁(yè)插圖9幅指導(dǎo)教師高明陽(yáng)教授申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士學(xué)位學(xué)科專業(yè)皮膚病與性病學(xué)培養(yǎng)單位大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院完成時(shí)間二。一四年四月答辯委員會(huì)主席關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的說明本學(xué)位論文作者完全了解學(xué)校有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱。本人授權(quán)大連醫(yī)科大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，．可以采用影印、縮印或掃描等復(fù)制手段保存和匯編本學(xué)位論文。本學(xué)位論文屬于請(qǐng)?jiān)谝韵孪鄳?yīng)方框內(nèi)打“√“1．保密口，在一年解密后適用本授權(quán)書。2．不保密口。作者簽名導(dǎo)師簽名日期年月ET日期年月日

簡(jiǎn)介：目的了解天津市源自病人的麻疹病毒野毒株的基因變異狀況及評(píng)價(jià)麻疹減毒活疫苗的免疫保護(hù)效果。方法1采集2002～2008年疑似麻疹患者的咽拭子和尿液標(biāo)本用VEROSLAM細(xì)胞分離麻疹病毒；2提取病毒培養(yǎng)液中的RNA用一步RTPCR方法擴(kuò)增麻疹病毒編碼核蛋白NUCLEOPROTEIN的N基因C端594個(gè)核苷酸片段擴(kuò)增產(chǎn)物直接測(cè)序后與國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)株進(jìn)行生物信息學(xué)分析；3使用GENRUNER軟件篩選N基因C端594個(gè)核苷酸片段的限制性內(nèi)切酶位點(diǎn)確定BCNⅠ用來建立RTPCRRFLP的麻疹病毒基因分型方法以區(qū)分麻疹病毒疫苗株和中國(guó)流行的野毒株；4采用酶聯(lián)免疫吸附方法對(duì)8月齡以下嬰兒麻疹疫苗初免前的抗體水平進(jìn)行分析了解保護(hù)性抗體的衰減過程；5采用酶聯(lián)免疫吸附方法和中和抗體檢測(cè)法對(duì)接種麻疹減毒活疫苗的健康人群免疫前后的抗體水平進(jìn)行測(cè)定評(píng)價(jià)麻疹減毒活疫苗對(duì)流行病毒株的保護(hù)效果；6采用酶聯(lián)免疫吸附方法檢測(cè)2010年麻疹疑似病例血清特異性IGM抗體了解天津麻疹疫情變化趨勢(shì)據(jù)此評(píng)價(jià)麻疹計(jì)劃免疫和2008年麻疹強(qiáng)化免疫的效果。結(jié)果1采集2002～2008年天津地區(qū)散發(fā)和暴發(fā)的麻疹疑似病例標(biāo)本共189份其中132份尿液中分離到57株麻疹病毒陽(yáng)性分離率為4318％；采集57份咽拭子中分離到23株麻疹病毒陽(yáng)性分離率為4035％2在所有分離到的80株麻疹病毒株中有11人是咽拭子和尿液同時(shí)陽(yáng)性取其一做PCR和序列分析鑒定的總數(shù)為69株。69株麻疹病毒經(jīng)對(duì)N基因C端594BP的RTPCRRFLP證實(shí)均為H1基因型其中除2002年1株145％病毒為H1B基因亞型其余均為H1A9855％基因亞型未發(fā)現(xiàn)疫苗相關(guān)株A基因型表明H1A亞型為優(yōu)勢(shì)流行型；3選取24株麻疹病毒進(jìn)行N基因C端450個(gè)核苷酸的種系發(fā)育分析2002～2008年流行的H1A亞型毒株的變異范圍為0002～00381～17個(gè)核苷酸差異表明天津地區(qū)流行的麻疹是由不同麻疹病毒株的多個(gè)傳播鏈引起的；4本論文建立的RTPCRRFLP方法可以區(qū)分中國(guó)麻疹病毒流行株H1A、H1B基因亞型及A基因型疫苗株與序列分析結(jié)果完全一致。該方法簡(jiǎn)便、快速、特異、經(jīng)濟(jì)適用于大量的流行病學(xué)調(diào)查；5對(duì)922名不同年齡組健康人疫苗免疫前后的特異性IGG抗體水平比較顯示其陽(yáng)性率無顯著性差異；但抗體效價(jià)的幾何平均滴度GMT方差分析提示小于8月齡、高中二年級(jí)和20～25歲三個(gè)年齡組的GMT水平較低其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；6采用中和抗體法評(píng)價(jià)13名8月齡兒童麻疹疫苗初免后IGG抗體對(duì)疫苗株和流行病毒株的保護(hù)作用兩者無顯著性差異表明當(dāng)前使用麻疹減毒活疫苗預(yù)防的有效性；7對(duì)160例8月齡以下嬰兒的麻疹保護(hù)性抗體水平進(jìn)行分析新生兒麻疹I(lǐng)GG抗體陽(yáng)性率僅為368％到7月齡時(shí)降至125％隨著月齡增長(zhǎng)逐漸衰減；82010年565例疑似麻疹病例中小于8月齡組和大于14歲組共計(jì)509例9009％遠(yuǎn)遠(yuǎn)多于8月齡～14歲組991％。509例疑似病例實(shí)驗(yàn)室確診329例陽(yáng)性率高達(dá)6464％表明2008年麻疹強(qiáng)化免疫是有效的但現(xiàn)行麻疹疫苗的免疫程序需要進(jìn)一步調(diào)整。結(jié)論1天津市流行的麻疹病毒株以H1A亞型為優(yōu)勢(shì)流行型N基因C端450個(gè)核苷酸分析顯示流行毒株間有1～17個(gè)核苷酸的差異表明存在多個(gè)不同的傳播鏈其變異屬于抗原漂移；28月齡兒童麻疹疫苗初免后產(chǎn)生的中和抗體對(duì)疫苗株和流行病毒株的保護(hù)作用無顯著性差異表明當(dāng)前使用的麻疹減毒活疫苗用來預(yù)防是有效的；38月齡以下嬰兒麻疹疫苗初免前抗體平均濃度GMC隨著月齡增長(zhǎng)逐漸衰減易感兒增多；不同年齡組健康人群疫苗免疫前后的特異性IGG抗體效價(jià)的幾何平均滴度GMT方差分析提示小于8月齡、高中二年級(jí)和20～25歲三個(gè)年齡組的抗體水平較低結(jié)合2010年麻疹疫情反彈的流行病學(xué)分析提示現(xiàn)行的麻疹疫苗免疫程序需要進(jìn)一步調(diào)整；4本研究建立的RTPCRRFLP方法能夠區(qū)分中國(guó)麻疹病毒流行株H1A、H1B基因亞型及A基因型疫苗株具有簡(jiǎn)便、快速、特異、經(jīng)濟(jì)的優(yōu)點(diǎn)適用于大量的流行病學(xué)調(diào)查。

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多傳染性脾腎壞死病毒ORF093L的功能鑒定及ORF006L、ORF037L和ORF115R的重組表達(dá)研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：腎綜合征出血熱（HEMRHAGICFEVERWITHRENALSYNDROME，HFRS）是由漢坦病毒（HANTAVIRUSHTV）引起，由鼠類等傳播的自然疫源性疾病，主要臨床特征為發(fā)熱、出血、腎臟損害，病死率高。我國(guó)是世界上腎綜合征出血熱疫情最嚴(yán)重的國(guó)家，年發(fā)病人數(shù)在25萬(wàn)左右，且新疫區(qū)不斷出現(xiàn)，并時(shí)有暴發(fā)流行。臨床上目前尚缺乏特異有效的治療藥物，因此，HFRS嚴(yán)重威脅著人類的健康。目前我國(guó)已經(jīng)成功研制出三類出血熱滅活疫苗，包括乳鼠腦純化滅活疫苗（HTN型）、細(xì)胞培養(yǎng)滅活單價(jià)疫苗（沙鼠腎細(xì)胞HTN型疫苗、地鼠腎細(xì)胞SEO型疫苗）和雙價(jià)疫苗（HTN型和SEO型）。雖然滅活疫苗的研制成功對(duì)預(yù)防HFRS的發(fā)生和流行起到了積極作用，但通過使用發(fā)現(xiàn)該類疫苗仍存在一些問題主要是其不能有效地刺激細(xì)胞免疫應(yīng)答，此外誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生中和抗體的能力也較弱，抗體滴度不高。因此研制更為有效的疫苗是預(yù)防HFRS發(fā)生和流行急需解決的問題。HFRS的病原體為漢坦病毒，屬于布尼亞病毒科（BUNYAVIRIDAE），漢坦病毒屬（HANTAVIRUS），是一類有包膜分節(jié)段的單負(fù)鏈RNA病毒，基因組包括L、M、S3個(gè)片段，分別編碼RNA聚合酶、包膜糖蛋白（GLYCOPROTEINGP）G1和G2、核衣殼蛋白（NUCLEOCAPSIDNP）。M基因編碼的GP可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生特異性中和抗體，且中和抗原位點(diǎn)主要位于G2糖蛋白上。S基因編碼的NP上亦分布有多個(gè)抗原表位，此外，NP還可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生強(qiáng)烈的細(xì)胞免疫反應(yīng)，參與機(jī)體對(duì)病毒的清除。研究表明GP的免疫原性較弱，誘導(dǎo)產(chǎn)生的抗體出現(xiàn)較晚且滴度不高。而NP是漢坦病毒結(jié)構(gòu)蛋白中免疫原性最強(qiáng)的，其刺激機(jī)體產(chǎn)生的抗體出現(xiàn)早，滴度高，且可誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生免疫保護(hù)。因此將二者融合表達(dá)，有望達(dá)到優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)的目的。在之前的研究中，我們將M基因與S基因的07KB片段進(jìn)行了融合表達(dá)，用嵌合基因免疫小鼠，可刺激小鼠同時(shí)產(chǎn)生針對(duì)病毒的特異性體液免疫和細(xì)胞免疫反應(yīng)。然而在研究中我們也發(fā)現(xiàn)了一些問題，如盡管利用各種系統(tǒng)均能表達(dá)出完整的融合蛋白，但總的來說蛋白表達(dá)量還是偏低。此外，免疫小鼠后雖然各表達(dá)系統(tǒng)均能刺激機(jī)體產(chǎn)生體液及細(xì)胞免疫應(yīng)答，且腺病毒表達(dá)系統(tǒng)的效果要優(yōu)于其他系統(tǒng)，但是整體的免疫水平還不十分理想。因此，進(jìn)一步選擇合適的表達(dá)載體、優(yōu)化表達(dá)系統(tǒng)并使抗原分子更為有效的遞呈，以提高嵌合基因的表達(dá)量及其刺激機(jī)體免疫應(yīng)答的能力，是目前HFRS基因工程疫苗研究中急需解決的問題。之前，我們已經(jīng)將腺病毒表達(dá)系統(tǒng)的轉(zhuǎn)錄調(diào)控結(jié)構(gòu)進(jìn)行了優(yōu)化，即引入CAG啟動(dòng)子與WPRE轉(zhuǎn)錄后調(diào)控序列。實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用CAG后，腺病毒中嵌合基因的表達(dá)水平提高兩倍左右且高于單獨(dú)或同時(shí)使用WPRE組。本課題擬在前期已優(yōu)化轉(zhuǎn)錄調(diào)控結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上，聯(lián)合應(yīng)用抗原加工遞呈分子基因HSP70C（熱休克蛋白70氨基端片段編碼基因）與UB基因，以進(jìn)一步提高嵌合基因表達(dá)抗原的加工和提呈，特別是進(jìn)一步提高刺激體液以及細(xì)胞免疫應(yīng)答的能力。1轉(zhuǎn)移載體的構(gòu)建依據(jù)GENBANK序列，設(shè)計(jì)引物，PCR擴(kuò)增得到HSP70C基因和UB基因并分別克隆入TEASY載體測(cè)序驗(yàn)證其正確性。隨后將HSP70C和UB分別插入PSHUTTLEG1S07CAG、PSHUTTLEG2S07CAG中，重組的轉(zhuǎn)移載體經(jīng)限制性內(nèi)切酶消化后，瓊脂糖凝膠電泳分析，陽(yáng)性克隆命名為PSHUTTLEG1S07CAGHSP70C、PSHUTTLEG2S07HSP70C、PSHUTTLEG1S07CAGUB、PSHUTTLEG1S07CAGUB。2重組腺病毒DNA的構(gòu)建將重組的轉(zhuǎn)移載體用PISCEⅠ和ICEUⅠ酶切后與ADENOXTMVIRALDNA連接，利用PCR鑒定重組的腺病毒DNA。3重組腺病毒的包裝及鑒定將含目的片段的重組腺病毒DNA轉(zhuǎn)化大腸桿菌進(jìn)行大量擴(kuò)增純化，并測(cè)定濃度。利用PACⅠ線性化重組腺病毒DNA后轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞。觀察細(xì)胞的CPE現(xiàn)象，通過反復(fù)凍融裂解細(xì)胞獲得病毒原種。取病毒原種加入感染HEK293細(xì)胞，獲得病毒初次擴(kuò)增產(chǎn)物，并用PCR法鑒定重組腺病毒。4重組腺病毒的純化與滴度測(cè)定用病毒初次擴(kuò)增產(chǎn)物感染單層HEK293細(xì)胞，將瓊脂糖凝膠與DMED混合物覆蓋其上，進(jìn)行噬斑實(shí)驗(yàn)。待出現(xiàn)噬斑后，挑取單斑獲得純病毒。從單層細(xì)胞的一個(gè)單斑中獲得病毒并擴(kuò)大培養(yǎng)。利用終點(diǎn)稀釋法測(cè)病毒的滴度，純化后的重組腺病毒滴度達(dá)109PFUML。5重組腺病毒表達(dá)產(chǎn)物的鑒定以100PFUCELL的MOI感染HEK293細(xì)胞，在2448H檢測(cè)細(xì)胞中蛋白的表達(dá)。免疫熒光結(jié)果表明，重組腺病毒感染的HEK293細(xì)胞均可被抗?jié)h坦病毒NP的特異性MAB1A8所識(shí)別。重組腺病毒ADG1S07CAGHSP70C及ADG2S07CAGHSP70C感染的HEK293細(xì)胞可被HSP70的特異性抗體識(shí)別，重組腺病毒ADG1S07CAGUB及ADG2S07CAGUB感染的HEK293細(xì)胞可被UB的特異性抗體識(shí)別。

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簡(jiǎn)介：分類號(hào)____________密級(jí)______________ＵＤＣ____________單位代碼______________碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文論文題目認(rèn)知識(shí)解理論觀照下的漢詩(shī)英譯研究學(xué)號(hào)_________________________姓名_________________________專業(yè)名稱_________________________學(xué)院_________________________指導(dǎo)教師_________________________論文提交日期2013年1月13日倪捷鳴公開116461111051012英語(yǔ)語(yǔ)言文學(xué)外語(yǔ)學(xué)院認(rèn)知識(shí)解理論觀照下的漢詩(shī)英譯研究認(rèn)知識(shí)解理論觀照下的漢詩(shī)英譯研究倪捷鳴倪捷鳴錢志富副教授H31ATHESISSUBMITTEDTONINGBOUNIVERSITYFTHEMASTER’SDEGREEASTUDYOFCHINESEENGLISHPOETRYTRANSLATIONFROMTHEPERSPECTIVEOFCOGNITIVECONSTRUALTHEYCIDATENIJIEMINGSUPERVISASSOCIATEPROFESSQIANZHIFUFACULTYOFFEIGNLANGUAGESNINGBOUNIVERSITYNINGBO315211，ZHEJIANGPRCHINADATEJANUARY132014

簡(jiǎn)介：認(rèn)知選擇任務(wù)中心理疲勞對(duì)瞳孔大小的影響分類號(hào)分類號(hào)單位代碼單位代碼1072710727密級(jí)級(jí)學(xué)號(hào)號(hào)20092009162162西安體育學(xué)院西安體育學(xué)院碩士學(xué)位論文碩士學(xué)位論文認(rèn)知選擇過程中心理疲勞對(duì)瞳孔大小的影響THEEFFECTOFMENTALFATIGUEONTHESIZEOFPUPILDURINGTHECOGNITIONCHOICEPROCESS學(xué)位申請(qǐng)人郭程程指導(dǎo)教師陳耕春教授學(xué)科專業(yè)應(yīng)用心理學(xué)研究方向運(yùn)動(dòng)與心理健康2012年3月認(rèn)知選擇任務(wù)中心理疲勞對(duì)瞳孔大小的影響摘要科技的發(fā)展導(dǎo)致了腦力勞動(dòng)者的增加，而現(xiàn)今快節(jié)奏的生活又成為了人類心理疲勞最主要的原因。日常工作中的長(zhǎng)時(shí)間簡(jiǎn)單重復(fù)的工作會(huì)導(dǎo)致對(duì)工作的厭倦，工作的難度也會(huì)消耗大量的動(dòng)機(jī)而導(dǎo)致心理疲勞。心理疲勞會(huì)導(dǎo)致工作時(shí)的心里努力下降，以及錯(cuò)誤率上升，反應(yīng)時(shí)變慢等認(rèn)知缺陷。眼睛是人類在接受外界刺激時(shí)最直接的感官，它大小的變化是由交感神經(jīng)和副交感神經(jīng)影響的，當(dāng)人在感受心理疲勞時(shí)，神經(jīng)系統(tǒng)會(huì)受到影響，此時(shí)，瞳孔是否會(huì)有明顯的變化來表明人體正在經(jīng)歷著心理疲勞癥狀，這是本研究的研究假設(shè)。本文主要選取大學(xué)生為被試，通過實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)的方法和訪談法，研究在認(rèn)知選擇任務(wù)中，任務(wù)時(shí)間的延長(zhǎng)和任務(wù)難度的增加而導(dǎo)致的心理疲勞是否會(huì)對(duì)人的瞳孔大小造成影響。本研究涉及兩個(gè)實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)一選取20名年齡和視力均無差異的大學(xué)生當(dāng)被試，用自編的球類圖片作為刺激材料，將刺激材料編入EPRIME軟件作成一個(gè)選擇性試驗(yàn)程序，實(shí)驗(yàn)時(shí)長(zhǎng)共2小時(shí)，每個(gè)刺激呈現(xiàn)3000毫秒，間隔500毫秒。本實(shí)驗(yàn)通過延長(zhǎng)任務(wù)的時(shí)間來誘發(fā)被試形成心理疲勞，觀察被試瞳孔變化情況。實(shí)驗(yàn)二的被試依然是20名年齡與視力均無差異的大學(xué)生，前一個(gè)小時(shí)的實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)一無差別，在后一個(gè)小時(shí)的實(shí)驗(yàn)中加大選擇任務(wù)的難度，并將刺激呈現(xiàn)時(shí)間算短到2000毫秒，以此要求被試在更短的時(shí)間內(nèi)完成更難的任務(wù)，最后再來觀測(cè)對(duì)瞳孔的影響。通過本研究我們發(fā)現(xiàn)，在實(shí)驗(yàn)一中，實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)被試的瞳孔面積小于實(shí)驗(yàn)開始時(shí)被試的瞳孔面積，并且差異顯著。這就說明，在長(zhǎng)時(shí)間簡(jiǎn)單重復(fù)的認(rèn)知選擇任務(wù)中，由于任務(wù)難度過低，被試不需付出心里努力，并且隨時(shí)間增長(zhǎng)，興趣下降導(dǎo)致心理疲勞，最后造成瞳孔變?。煌瑫r(shí)，在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后對(duì)被試的訪談中發(fā)現(xiàn)，被試均將此實(shí)驗(yàn)描述成一次痛苦的任務(wù)，并且稱隨著實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行，這種“痛苦”、“煩躁”的情緒更加嚴(yán)重。在實(shí)驗(yàn)二中，在增加了選擇難度之后，瞳孔面積較以前有所增大，并且差異顯著，但與之后的瞳孔面積相比，差異不明顯。這就說明，增加任務(wù)難度后，由于被試付出了更多的心里努力造成了神經(jīng)系統(tǒng)突然緊張，瞳孔會(huì)放大，并且在一段時(shí)間內(nèi)瞳孔大小浮動(dòng)不大，這也可以解釋為，認(rèn)知選擇任務(wù)時(shí)間和任務(wù)難度在一定程度上對(duì)瞳孔的變化存在著拮抗作用。關(guān)鍵詞關(guān)鍵詞心理疲勞心理疲勞認(rèn)知認(rèn)知選擇選擇瞳孔大小瞳孔大小

簡(jiǎn)介：目的探討慢性乙型肝炎病毒CHB患者外周血HLAA2限制性HBCAG特異性細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞CTL的功能及抗病毒治療對(duì)其影響。方法研究對(duì)象共216人，分顯性感染組、隱性感染組、攜帶組和對(duì)照組四組。其中顯性感染組73例為臨床診斷慢乙肝患者；隱性感染組60例為無肝病史、無乙肝疫苗接種史，肝功能生化檢測(cè)始終正常，HBVDNA陰性，血清學(xué)抗HBS陽(yáng)性，及抗HBC和或抗HBE陽(yáng)性者；攜帶組53例為無癥狀HBVDNA陽(yáng)性者；對(duì)照組30例為健康獻(xiàn)血員。所有研究對(duì)象采集靜脈血，分離單個(gè)核細(xì)胞，采用流式細(xì)胞術(shù)直接免疫熒光法檢測(cè)各組HLAA2基因分布頻率；以HBCAG1827V和HBCAG1827I兩條多肽分別刺激各組HLAA2陽(yáng)性者外周血單個(gè)核細(xì)胞PBMC，用ELISPOT酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)法檢測(cè)刺激PBMC后分泌IFNΓ的陽(yáng)性斑點(diǎn)數(shù)；顯性感染組HLAA2陽(yáng)性者接受52周的核苷酸類藥物抗病毒治療，于治療前、后分別檢測(cè)血清乙肝病毒感染標(biāo)記物和血清ALT、HBVDNA，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果將接受治療者分為不完全應(yīng)答組和完全應(yīng)答組；ELISPOT法檢測(cè)兩組PBMC對(duì)HBCAG1827V和HBCAG1827I兩條多肽刺激后分泌IFNΓ的陽(yáng)性斑點(diǎn)數(shù)，分析比較兩組間治療后和治療前、后各組平均反應(yīng)強(qiáng)度應(yīng)答變化。結(jié)果1顯性感染組HLAA2基因分布頻率為521％3873；隱性感染組HLAA2基因分布頻率為517％3160；攜帶組HLAA2基因分布頻率為491％2653；對(duì)照組HLAA2基因分布頻率為500％1530，各組間HLAA2基因分布頻率無顯著差異P＞005。2各組HLAA2陽(yáng)性者特異性CTL功能的ELISPOT撿測(cè)結(jié)果1各組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例相似；隱性感染組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例明顯高于顯性感染組P＜005；兩組顯著高于無癥狀攜帶組和對(duì)照組P＜005；而后兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。2各組對(duì)兩條多肽的平均反應(yīng)強(qiáng)度相似；隱性感染組對(duì)兩條多肽的平均反應(yīng)強(qiáng)度明顯高于顯性感染組P＜005；兩組顯著高于無癥狀攜帶組和對(duì)照組P＜005；而后兩組間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。3組間比較，治療后完全應(yīng)答組對(duì)兩條多肽的應(yīng)答比例和平均反應(yīng)強(qiáng)度均明顯高于不完全應(yīng)答組P＜005；治療前兩組無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異P＞005。組內(nèi)比較，治療后完全應(yīng)答組應(yīng)答比例和平均反應(yīng)強(qiáng)度均明顯高于治療前P＜005；不完全應(yīng)答組治療前、后無顯著差異P＞005。結(jié)論1各組間HLAA2基因分布頻率無差別。HBV感染表現(xiàn)形式或轉(zhuǎn)歸與HLAA2基因分布無明顯關(guān)系。2不同表現(xiàn)形式的HBV感染者外周血HBCAG特異性CTL經(jīng)特異性抗原多肽HBCAG1827VI刺激后分泌。IFNΓ的水平不同，隱性感染者的自愈和清除病毒可能與其應(yīng)答水平較高有關(guān)。3核苷類藥物抗病毒治療可增強(qiáng)HBCAG特異性CTL細(xì)胞分泌IFNΓ的能力，可能使CHB患者細(xì)胞免疫應(yīng)答有一定程度的恢復(fù)。4ELISPOT方法體外檢測(cè)特異性T淋巴細(xì)胞分泌IFNΓ的能力有可能作為判斷機(jī)體抗病毒能力的細(xì)胞免疫指標(biāo)。

簡(jiǎn)介：第二軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文ELT3配體重組腺病毒和阿霉素聯(lián)合應(yīng)用對(duì)小鼠肝癌治療的實(shí)驗(yàn)研究姓名李剛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)外科學(xué)（肝外）指導(dǎo)教師吳孟超張柏和200151中義摘要對(duì)其抗腫瘤的作用研究較少國(guó)外也未見應(yīng)用FLT3配體重組腺病毒對(duì)肝癌進(jìn)行基因治療的報(bào)道，尤其是應(yīng)用FLT3配體重組腺病毒和化療聯(lián)合應(yīng)用。而且我們采用FLT3配體重組腺病毒腫瘤局部注射和全身化療相結(jié)合的方法，更符合臨床治療思路，并且取得了預(yù)期的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。希望我們的實(shí)驗(yàn)?zāi)転楦伟┑呐R床治療提供新思路，并為FLT3配體應(yīng)用到臨床提供理論依據(jù)。下一步的研究方向1FLT3配體重組腺病毒和化療藥抗腫瘤作用協(xié)同的機(jī)制2FLT3配體重組腺病毒和化療藥抗腫瘤的中遠(yuǎn)期效果；3改進(jìn)腺病毒載體，降低載體本身的毒副作用；4FLT3、配體和放療相結(jié)合抗腫瘤治療5多基因聯(lián)合治療。廣、?U一／關(guān)鍵詞FLT3配帶7重組腺病害化療7基因治爐肝癌、小鼠免疫學(xué)造血系統(tǒng)恢復(fù)毒副作用

簡(jiǎn)介：目的通過柯薩奇病毒B3CVB3感染體外培養(yǎng)的HELA細(xì)胞，觀察MT信號(hào)通路及下游信號(hào)分子MT、PMT、P70S6K、PP70S6K、4EBP1、P4EBP1表達(dá)或活性的變化。方法以CVB3感染HELA細(xì)胞后3、6、9、12、24H作為病毒組，以未被CVB3感染的同一時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞作為對(duì)照組運(yùn)用WESTERNBLOT檢測(cè)MT、PMT、P70S6K、PP70S6K、4EBP1、P4EBP1表達(dá)的變化免疫熒光檢測(cè)MT信號(hào)通路下游分子4EBP1在細(xì)胞的定位。結(jié)果1、CVB3感染HELA細(xì)胞后，不同時(shí)間點(diǎn)感染后MT、PMT、P70S6K、PP70S6K、4EBP1、P4EBP1表達(dá)含量變化及與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜005）①病毒組MT及PMT的表達(dá)低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜005），且隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸降低，對(duì)照組隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸增加②病毒組P70S6K及PP70S6K表達(dá)低于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜005），且隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白逐漸表達(dá)降低，對(duì)照組蛋白表達(dá)隨時(shí)間延長(zhǎng)逐漸增加③病毒組4EBP1、P4EBP1蛋白表達(dá)均高于同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組（P＜005）。對(duì)照組4EBP1及P4EBP1在9H時(shí)間點(diǎn)表達(dá)最低。病毒組4EBP1及P4EBP1隨時(shí)間延長(zhǎng)蛋白表達(dá)逐漸升高。2、通過直線相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)病毒組MT與P70S6K蛋白表達(dá)之間具有正相關(guān)關(guān)系，對(duì)照組間無相關(guān)關(guān)系病毒組MT與4EBP1蛋白表達(dá)之間具有負(fù)相關(guān)關(guān)系，而二者在對(duì)照組具有正相關(guān)關(guān)系MT與PMT兩組間均具有正相關(guān)關(guān)系，P70S6K與PP70S6K蛋白表達(dá)病毒組具有正相關(guān)關(guān)系，對(duì)照組無相關(guān)關(guān)系。病毒組4EBP1與P4EBP1蛋白表達(dá)無明顯相關(guān)，對(duì)照組具有正相關(guān)關(guān)系。3免疫熒光檢測(cè)4EBP1在不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)照組以細(xì)胞質(zhì)表達(dá)為主，病毒組在胞質(zhì)胞核中均有表達(dá)，病毒組表達(dá)水平較對(duì)照組高。4EBP1在病毒組12小時(shí)后細(xì)胞核表達(dá)逐漸增強(qiáng)。結(jié)論1、CVB3感染HELA細(xì)胞后可抑制MTP70S6K通路，激活MT4EBP1通路。2、CVB3可能作為負(fù)調(diào)控生長(zhǎng)因子促進(jìn)4EBP1在細(xì)胞的表達(dá)。

簡(jiǎn)介：目的通過觀察乙型肝炎病毒干預(yù)后小鼠肝臟樹突狀細(xì)胞干擾素調(diào)節(jié)因子3表達(dá)的變化，探討HBV持續(xù)感染分子免疫機(jī)制。方法采用細(xì)胞濾網(wǎng)過濾、PERCOLL密度梯度離心和免疫磁珠分選法分離肝臟樹突狀細(xì)胞，并用粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子和白介素4誘導(dǎo)培養(yǎng)。將樹突狀細(xì)胞分為兩組一組與HBV共培養(yǎng)，另一組加入等量的細(xì)胞培養(yǎng)液作為正常對(duì)照組。24H后，兩組均加入POLYIC刺激，收集不同時(shí)間點(diǎn)細(xì)胞和上清，留細(xì)胞培養(yǎng)液作為空白對(duì)照，用WESTERNBLOT檢測(cè)IRF3表達(dá)，用ELISA法檢測(cè)上清中IFNΒ濃度。結(jié)果1DC與HBV共培養(yǎng)前，IRF3表達(dá)弱。用POLYIC刺激DC后，IRF3表達(dá)明顯增加，呈時(shí)相性，在26H達(dá)到高峰。DC與HBV共培養(yǎng)后，再用POLYIC刺激，IRF3表達(dá)的時(shí)相性不明顯，未見明顯升高。DC表達(dá)IRF3的能力與病毒載量有關(guān)，高病毒載量能明顯抑制IRF3表達(dá)，病毒載量低于106COPIESML時(shí)差異不明顯。2OH時(shí)HBV組培養(yǎng)液上清IFNΒ濃度1238±371PGML與正常對(duì)照組1083±411PGML相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T08398，P005。POLYIC刺激后6H，HBV組培養(yǎng)液上清IFNΒ濃度8867±901PGML與正常對(duì)照組13768±1228PGML相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T9653，P＜001。POLYIC刺激后24H，HBV組培養(yǎng)液上清IFNΒ濃度6989±580PGML與正常對(duì)照組7225±861PGML相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義T06820，P＞005。結(jié)論1用POLYIC刺激正常DC后，IRF3表達(dá)增加，呈時(shí)相性。2HBV干預(yù)后，用POLYIC刺激DC后，IRF3表達(dá)增加不明顯。高載量HBV能明顯抑制肝臟樹突狀細(xì)胞IRF3的表達(dá)。3HBV干預(yù)后，肝臟樹突狀細(xì)胞IRF3下游IFNΒ表達(dá)降低。

簡(jiǎn)介：湖南師范大學(xué)碩士學(xué)位論文腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白MTSS1慢病毒干擾載體的構(gòu)建和鑒定姓名毛亞江申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士專業(yè)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師王迎20100501體、軸突與樹突中均有表達(dá)，暗示它可能參與該神經(jīng)元形態(tài)相關(guān)的功能。與過量表達(dá)OVEREXPRESSION相對(duì)，KNOCKDOWN或KNOCKOUT技術(shù)導(dǎo)致目標(biāo)蛋白表達(dá)降低或缺失是功能研究的常用手段之一，兩者相輔相成，結(jié)果互為印證。與KNOCKOUT技術(shù)相比，KNOCKDOWN技術(shù)要求低，投入少，已在功能研究中廣泛應(yīng)用。其中的RNA干擾技術(shù)RNAINTERFERENCERNAI通過雙鏈RNA的介導(dǎo)，特異性阻抑相關(guān)序列的表達(dá)，從而導(dǎo)致轉(zhuǎn)錄后水平的基因沉默。RNAI是一種高效的特異性強(qiáng)的基因阻斷技術(shù)，近年來發(fā)展迅速，已被廣泛的應(yīng)用于功能基因組研究。慢病毒介導(dǎo)的RNA干擾適用于包括神經(jīng)元在內(nèi)的非分裂期細(xì)胞，而且效率高。以它為工具來探索MTSSL在浦肯野神經(jīng)元中的功能比較合適，所以在我們的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)中擬采用慢病毒感染的方法對(duì)浦肯野神經(jīng)元的內(nèi)源MTSSL進(jìn)行KNOCKDOWN。為了制備針對(duì)MTSSL的高效慢病毒，我們首先針對(duì)小鼠MTSSL基因，利用INVITROGEN公司的在線設(shè)計(jì)軟件BLOCKIT刪RNAIDESIGNERHTTPS／／RNAIDESIGNERINVITROGENCOM／RNAI設(shè)計(jì)三對(duì)特異性SHRNA序列。送至上海生物工程有限公司合成。接著，為檢測(cè)這三段序列的有效性，我們將合成的SHRNA片段連接到SHRNA干擾載體PSUPERRETROPURO中，經(jīng)酶切和測(cè)序鑒定干擾載體構(gòu)建成功，將之瞬間轉(zhuǎn)染GFPMTSSL過量表達(dá)的細(xì)胞系中，利用WESTERNBLOT檢測(cè)KNOCKDOWN的效率，結(jié)果顯示三段序列干擾效率均達(dá)60％以上。在驗(yàn)證了序列的有效性之后，利用ECORLCLAL雙酶切將含目的II

簡(jiǎn)介：點(diǎn)擊查看更多庚型肝炎病毒和人干擾素αA-2b cDNA噬菌體隨機(jī)展示肽庫(kù)的構(gòu)建及鑒定.pdf精彩內(nèi)容。

簡(jiǎn)介：復(fù)旦大學(xué)博士學(xué)位論文2型糖尿病患者的認(rèn)知功能及腦誘發(fā)電位研究姓名左玲俊申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別博士專業(yè)精神病學(xué)與精神衛(wèi)生指導(dǎo)教師顧牛范200151結(jié)論1伴有微血管并發(fā)癥的DM患者的記憶有較大幅度的顯著下降。2不伴有微血管并發(fā)癥的DM患者記憶下降的幅度相對(duì)較小，記憶水平介于正常對(duì)照與伴有微血管并發(fā)癥的DM患者之間。3伴有和不伴有微血管并發(fā)癥的DM患者P300、ABR均有顯著改變。4與記憶下降相比，不伴有微血管并發(fā)癥的DM患者BEP有更加明顯的改變。5DM患者認(rèn)知功能的改變主要表現(xiàn)在相對(duì)復(fù)雜的認(rèn)知加工過程中，記憶下降主要表現(xiàn)在自由回憶方面。6DM患者P300與記憶顯著相關(guān)，其中以P300波幅對(duì)記憶的貢獻(xiàn)更大。7抑郁進(jìn)一步加重DM患者的認(rèn)知功能及BEP改變，但程度相對(duì)較輕。P／，第二部分2型糖尿病患者認(rèn)知功能相關(guān)因素的探討目的初步探討DM患者發(fā)生認(rèn)知功能改變的相關(guān)因素以及它們相關(guān)的程度。方法對(duì)L05例DM患者進(jìn)行認(rèn)知功能及微血管并發(fā)癥等的測(cè)定用逐步回歸分析的方法探討與DM患者認(rèn)知功能有關(guān)的因素。結(jié)果1微血管并發(fā)癥與記憶商得分顯著負(fù)相關(guān)。2DM病程與完成連線測(cè)驗(yàn)A所需時(shí)間顯著正相關(guān)；3DM有關(guān)的高血壓與宮格補(bǔ)缺、巧拼方塊得分顯著負(fù)相關(guān)。結(jié)論微血管并發(fā)癥、DM病程、DM有關(guān)的高血壓是DM患者發(fā)生認(rèn)知功能下降的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。，第三部分降血糖治療對(duì)2型糖尿病患者記憶及腦誘發(fā)電位改變的作用目的了解降血糖治療對(duì)DM患者認(rèn)知功能及BEP的作用。方法治療前后分別對(duì)23例DM患者進(jìn)行記憶、P300、SEP、ABR以及有無抑郁等的測(cè)定。結(jié)果1治療后，DM患者的記憶、P300的P3波幅以及ABR的波V波幅均有顯著提高。2治療后，伴有抑郁組的記憶以及BEP均無顯著改變?！Y(jié)論1降血糖治療后，DM患者的記憶以及BEP有顯著的改善。2DM患者伴發(fā)抑郁可影響降血糖治療對(duì)DM患者記憶以及BEP的改

簡(jiǎn)介：河北醫(yī)科大學(xué)學(xué)位論文使用授權(quán)及知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬承諾本學(xué)位論文在導(dǎo)師或指導(dǎo)小組的指導(dǎo)下，由本人獨(dú)立完成。本學(xué)位論文研究所獲得的研究成果，其知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。河北醫(yī)科大學(xué)有權(quán)對(duì)本學(xué)位論文進(jìn)行交流、公開和使用。凡發(fā)表與學(xué)位論文主要內(nèi)容相關(guān)的論文，第一署名為單位河北醫(yī)科大學(xué)，試驗(yàn)材料、原始數(shù)據(jù)、申報(bào)的專利等知識(shí)產(chǎn)權(quán)均歸河北醫(yī)科大學(xué)所有。否則，承擔(dān)相應(yīng)法律責(zé)任。研究生簽名勿／乃導(dǎo)師簽章尹拗力蘆級(jí)學(xué)院領(lǐng)導(dǎo)蓋章?！?，卅，≯年碉／日河北醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本論文是在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作及取得的研究成果，除了文中特別加以標(biāo)注和致謝等內(nèi)容外，文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫的研究成果，指導(dǎo)教師對(duì)此進(jìn)行了審定。本論文由本人獨(dú)立撰寫，文責(zé)自負(fù)。研究生簽名杉，乃茗厶／節(jié)月力明夕年煢一簽_卜EJJIY，導(dǎo)材料與方法62結(jié)果一67附圖69討論74小結(jié)75參考文獻(xiàn)76結(jié)論81綜述一WIPL基因在腫瘤中的研究進(jìn)展82綜述二乳腺癌干細(xì)胞相關(guān)研究進(jìn)展93致謂”103個(gè)人簡(jiǎn)歷104