P-糖蛋白在醋柳黃酮組分口服吸收中的作用與調控研究.pdf

1、中藥藥理活性成分的明確及其作用機制的研究，尤其是活性組分體內過程的明確是中藥科學研究的關鍵問題，而中藥活性組分吸收機理的研究是中藥體內過程研究的第一步，是中藥科學研究的瓶頸問題。揭示中藥活性組分的吸收機理，明確其吸收過程中轉運體的作用、作用機制與作用程度，以及中藥中多種活性組分在吸收過程中的相互作用，有利于建立中藥生物藥劑學基礎研究方法，揭示中藥作用特點及組方理論的科學內涵。 本課題的目的為研究P-糖蛋白(P-glycoprot

2、ein，P-gp，MDR1)等外排型轉運體在中藥成分口服吸收過程中的作用，探索P-gp調控對其口服吸收的影響。研究工作選擇臨床長期應用、對心血管疾病具有顯著預防與治療作用的中藥有效部位醋柳黃酮為模型藥物，重點選擇其中指標成分——異鼠李素等黃酮醇為研究對象，以基因工程細胞模型(MDR1轉染MDCKⅡ細胞)、Caco-2細胞模型、整體實驗動物模型三種吸收研究方法相結合，揭示“醋柳黃酮”組分的吸收機理及P-gp在其中的作用、P-gp調控對其吸

3、收的影響、P-gp介導醋柳黃酮中各組分與異鼠李素在透膜過程中的相互作用。三種不同層次的研究方法得到的結果具有良好的相關性，醋柳黃酮中三種主要組分大鼠灌胃后藥時曲線下面積、峰濃度大小均為山奈酚>槲皮素>異鼠李素；異鼠李素、槲皮素與山奈酚的Caco-2細胞模型A側(apical，項側)到B側(basolateral，基底側)表觀滲透系數(shù)分別為2.28±0.11、4.97±0.25、8.74±0.27(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，

4、B側到A側表觀滲透系數(shù)分別為3.09±0.08、6.69±0.79、9.30±0.87(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，比值分別為0.74、0.74與0.94，異鼠李素、槲皮素與山奈酚均存在腸道外排現(xiàn)象。在整體動物研究與Caco-2細胞轉運研究的基礎上，采用MDR1-MDCK Ⅱ細胞模型進一步研究了異鼠李素與P-gp的相互作用，異鼠李素MDR1-MDCK Ⅱ細胞模型A側到B側表觀滲透系數(shù)為1.22±0.11(×10<'-6>，c

5、m.s<'-1>)，B側到A側的表觀滲透系數(shù)為4.96±0.03(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，其比值為0.24，試驗結果與前期試驗結果具有良好的相關性，進一步確證了異鼠李素是P-gp的底物，由P-gp等外排型轉運體介導的腸道外排與膽汁排泄導致醋柳黃酮中各組分藥時曲線的多峰現(xiàn)象。合用維拉帕米(P-gp抑制劑)與地高辛(P-gp底物)可增加異鼠李素的腸道吸收，增加異鼠李素的口服生物利用度；利福平等膽鹽排泄抑制劑可抑制異鼠李素的膽

6、汁排泄而增加其生物利用度。醋柳黃酮中其它組分與異鼠李素體內過程均存在不同程度的相互作用，合用后各自腸道吸收均不同程度地增加，P-gp功能的抑制是其體內藥動學相互作用的機制之一，其它某些外排型轉運體，如多藥耐藥性相關蛋白2與乳腺癌耐藥相關蛋白1也可能是介導此相互作用發(fā)生的機制之一。因此，醋柳黃酮有效部位給藥較其中組分單獨給藥更具有生物藥劑學的優(yōu)勢，其中各組分可相互增加口服生物利用度。 在分子水平、細胞水平和整體動物水平研究中藥組分