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文檔簡介
1、目的:構建靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表達載體,觀察其轉染胃癌SGC7901細胞后對胃癌細胞PRL-3基因表達的影響。
方法:設計并合成兩條針對PRL-3基因的特異性miRNA495和miRNA551a干擾序列,分別與pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR載體連接,轉化大腸桿菌,純化并鑒定后利用LipofectamineTM2000轉染胃癌SGC7901細胞,實時定量PCR及Western
2、blot技術鑒定重組體對PRL-3基因表達的干擾效果。
結果:針對PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a干擾質粒構建成功,胃癌SGC7901細胞分別轉染兩種質粒后miRNA495及miRNA551a的表達明顯升高,并且明顯抑制了PRL-3基因mRNA及蛋白的表達。
結論:靶向PRL-3基因的miRNA495和miRNA551a真核表達載體構建成功,其可有效提高胃癌SGC7901細胞miRNA495和mi
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