敲減長鏈非編碼RNA ATB抑制膠質瘤細胞增殖、遷移和侵襲.pdf

1、目的：
　　采用shRNA ATB敲減膠質瘤U87細胞中ATB后，研究其對人膠質瘤細胞增殖、遷移和侵襲的影響。
　　方法：
　　本研究采用實時定量PCR（qRT-PCR）方法檢測ATB在人膠質瘤細胞系U87與正常人腦膠質細胞HEB中的表達情況。并在此基礎上構建了ATB表達載體shRNA ATB質粒，利用構建成功的質粒轉染人膠質瘤U87細胞株，獲取新的U87細胞，該細胞具有低表達ATB的特點。應用MTT法檢測敲減ATB后

2、對U87細胞增殖的影響；應用細胞克隆實驗檢測敲減ATB后對U87細胞克隆增殖能力的影響；應用Transwell實驗檢測敲減ATB后對U87細胞遷移和侵襲能力的影響。應用Western blot法檢測敲減ATB后PCNA蛋白表達情況。
　　結果：
　　qRT-PCR結果顯示，人腦膠質瘤細胞系U87中ATB表達水平與正常人腦膠質細胞 HEB相比，較之明顯上調（P<0.01）；與 shRNA正常對照組相比，轉染了shRNA-ATB

3、的實驗組細胞能的ATB水平顯著較少（P<0.01）；細胞克隆實驗顯示shRNA-ATB實驗組細胞克隆形成能力較 shRNA對照組明顯降低（P<0.01）； MTT結果表明敲減細胞內ATB后細胞增殖的速率較shRNA對照組有明顯的較低（P<0.01）。Transwell實驗進一步驗證了敲減膠質瘤U87細胞中的ATB后，細胞遷移和侵襲能力明顯受到抑制（P<0.01）。此外，Western blot實驗進一步驗證敲減膠質瘤U87細胞中的ATB