神經調節(jié)素對腦缺血再灌注損傷后ERK5信號通路的調節(jié)機制.pdf

1、目的：探討神經調節(jié)素1β對腦缺血再灌注損傷后ERK5信號通路的調節(jié)作用機制，為治療腦梗死提供理論依據。
　　方法：健康SPF級成年雄性Wistar大鼠（體質量250±20g），采用線栓法建立大鼠大腦中動脈閉塞（MCAO）模型，隨機對照原則分為假手術組、模型組、治療組、抑制劑組、抑制劑+治療劑組。經頸內動脈注射NRG1β5μl（2μg/kg）和ERK5特異性抑制劑BIX021895μl（4mg/kg）干預。應用激光多普勒儀檢測大鼠局

2、部的腦血流量（rCBF）評判動物模型是否成功；改良神經功能缺損評分（mNSS）評價大鼠神經行為功能；氯化三苯基四氮唑（TTC）染色檢測梗死體積；HE染色法觀察缺血腦組織病理改變；原位末端標記法（TUNEL）檢測缺血后神經細胞凋亡；免疫組化（ICH）和蛋白免疫印跡（Western blot）檢測缺血腦組織中磷酸化MEK5、ERK5和MEF2C表達；透射電鏡觀察神經元、髓鞘及血腦屏障（BBB）的超微結構。
　　結果：大鼠腦缺血后rCB

3、F顯著下降至未插入線栓前的30%及以下，拔出線栓實現再灌注后其rCBF恢復至未插入線栓前的80%及以上，提示大鼠MCAO/R模型制備成功。大鼠腦缺血再灌注損傷后，發(fā)生神經行為功能障礙，皮質區(qū)出現梗死灶，神經細胞受損，神經細胞凋亡增多，pMEK5、pERK5及pMEF2C表達升高，神經元、髓鞘及BBB超微結構損傷嚴重。與模型組相比較，治療組大鼠缺血部位神經元、髓鞘及BBB超微結構損傷減輕，pMEK5、pERK5和pMEF2C表達進一步增強

4、，凋亡神經細胞數明顯減少，腦缺血區(qū)梗死體積明顯縮小（P＜0.05），神經行為功能改善。抑制劑組大鼠神經行為功能障礙、腦梗死體積、神經細胞受損程度更加嚴重、細胞凋亡更多，pMEK5、pERK5和pMEF2C蛋白表達顯著下降，神經元、髓鞘和BBB超微結構損傷更嚴重。抑制劑+治療劑組大鼠較抑制劑組大鼠相比，pMEK5、pERK5、pMEF2C表達明顯增強（P＜0.01），腦梗死體積顯著縮?。≒＜0.001），神經細胞損傷程度顯著減輕、凋亡數量