楊桃根中苯醌類提取物DMDD對APP-PS1小鼠抗癡呆作用及機制的研究.pdf

1、目的:
　　研究楊桃根中2-十二烷基-6-甲氧基-2，5-二烯-1，4-環(huán)己二酮(DMDD)對APP/PS1轉基因癡呆模型小鼠的學習記憶能力、炎癥因子、自由基、神經遞質、凋亡因子的影響，探討DMDD抗癡呆作用及機制。
　　方法:
　　本研究采用APP/PS1轉基因癡呆小鼠(APP/PS1T)作為實驗對象，將該癡呆模型小鼠隨機分為模型組、石杉堿甲組（0.03 mg·kg-1·d-1）、2-十二烷基-6-甲氧基-2，5-二

2、烯-1，4-環(huán)己二酮（2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2，5-diene-1，4-dione，DMDD）高劑量組(50 mg·kg-1·d-1)、DMDD中劑量組（25 mg·kg-1·d-1）、DMDD低劑量組(12.5mg·kg-1·d-1)，每組10只。另設10只APP/PS1正常小鼠(APP/PS1W)作為正常對照組，給予與其他組等體積的生理鹽水。連續(xù)灌胃給藥治療21d。通過Morris水迷宮試驗來觀察

3、各組小鼠學習記憶等行為學能力的變化;病理染色觀察各組小鼠海馬組織的形態(tài)學變化;檢測小鼠腦組織中膽堿能神經遞質、炎癥因子、自由基、單胺類神經遞質的活性及含量。還采用免疫組織化學染色法來檢測DMDD對各組小鼠海馬組織中細胞凋亡因子、β淀粉樣前體蛋白(β-APP)、β淀粉樣蛋白(Aβ)及Tau蛋白磷酸化的表達水平。蛋白免疫印跡法(Western blot)用于檢測小鼠腦組織中Bax、Bcl-2的表達。
　　結果:
　?、貲MDD能

4、減少癡呆模型小白鼠隱蔽平臺測試實驗、反向測試實驗和可視平臺測試實驗中的逃避時間，以及增加探索測試實驗中癡呆小鼠穿越原平臺次數;
　?、贖E結果顯示DMDD各給藥組的海馬錐體細胞均存在缺血性改變及變性脫失，但其變性脫失細胞數量均比模型組少;DMDD治療組小鼠神經元形態(tài)較大、基本正常，核膜存在輕度凹陷，核仁明顯，邊聚，核固質內線粒體、粗面內質網、游離核糖體數量較多，但少量存在粗面內質網囊腔膨脹，溶酶體及脂褐素顆粒較模型組多。神經氈內突

5、起較多，突觸結構較多，但局部神經氈內仍存在空化結構，神經絲及線粒體消失;
　　③DMDD能增加癡呆小鼠腦組織中ChAT的活性及ACh的含量，降低AChE的活性，減少炎癥因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-8的含量，提高腦組織中DA、NE、5-HT的含量;
　?、蹹MDD能提高小鼠腦組織中SOD、GSH-Px的活性，降低MDA、NO的含量及NOS的活性;
　?、軩MDD能降低癡呆小鼠海馬組織中促凋亡因子p53、B

6、ax、及增加抑凋亡因子Bcl-2的表達，降低APP、Aβ的含量及減少Tau(pSer202)磷酸化的陽性細胞數，抑制海馬神經元的凋亡。
　　結論:
　　從結果中得知，DMDD具有減少癡呆小鼠腦組織中ACh的降解，調節(jié)單胺類神經遞質的合成，抑制炎癥因子的生成，降低Tau蛋白磷酸化以及抑制海馬神經元凋亡的作用，由此推測DMDD可能是通過抑制APP、Aβ的生成，降低Aβ蛋白聚集及沉淀，從而使Tau蛋白異常磷酸化得到抑制，而減少Aβ