臍血血脂水平和胎盤脂質代謝相關因子表達與巨大兒發(fā)生的關系研究.pdf

1、目的：巨大兒（Macrosomia）是指出生體重≥4,000 g的活產新生兒。目前，世界范圍內巨大兒的發(fā)生率均呈上升趨勢。巨大兒不僅會導致產程延長、剖宮產、增加產后感染和出血的風險，還會造成新生兒出生窒息、肩難產等損傷，甚至增加其兒童期肥胖、成年后患糖尿病及心血管疾病等的風險。臍血血脂水平可反應胎兒脂質代謝情況，與胎兒生長發(fā)育密切相關，兒童的血清脂蛋白分布可以預測成年人的血清脂蛋白分布。胎兒脂肪酸水平不僅受母體飲食的影響，還受胎盤轉運和

2、代謝的影響。胎盤轉運功能異常可能導致胎兒血脂水平改變與脂質代謝異常，影響胎兒生長發(fā)育，導致巨大兒的發(fā)生。其中長鏈脂肪酸需要通過胎盤中的轉運蛋白轉移到胎兒，在人類胎盤中已鑒定出幾種涉及脂質轉運和代謝的蛋白：過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARG)脂肪酸結合蛋白(FABP)、脂肪酸轉位酶(FAT/CD36)、脂肪酸轉運蛋白(FATP)等。然而，目前針對巨大兒的研究多集中于妊娠糖尿?。℅DM）導致的巨大兒，關于糖代謝正常產婦生產的巨大兒臍血

3、血脂水平及胎盤脂質代謝相關因子的研究仍然缺乏。因此，本研究擬通過檢測正常妊娠孕婦分娩的巨大兒臍血血脂水平，以及影響血脂轉運的胎盤脂質代謝相關因子的表達水平，探討它們與巨大兒發(fā)生的關系，并分析其與其它孕期因素共同對巨大兒發(fā)生的影響程度，為巨大兒病因學研究提供新線索。
　　方法：采用病例-對照研究的設計方法，連續(xù)收集2014年6月至2015年6月間在溫州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院行常規(guī)產前檢查并在該院分娩的新生兒及產婦作為研究對象。病例組（

4、巨大兒組）為出生體重≥4000g的新生兒及母親，對照組為出生體重在2500g～3999g，且與巨大兒出生時間相差3天以內隨機選擇的新生兒及母親。所有對象的入選標準為正常妊娠，單胎、足月分娩，糖耐量試驗正常而且新生兒沒有先天性畸形。排除標準包括有妊娠合并癥、有妊娠并發(fā)癥者、新生兒先天畸形者。采用自行設計的問卷以及醫(yī)院信息采集系統(tǒng)調查/收集產婦及新生兒相關資料。新生兒娩出后，立即采集胎盤、臍血樣本。通過自動生化分析儀測定臍血血脂水平，采用比

5、色法游離脂肪酸（NEFA）試劑盒測定臍血游離脂肪酸水平，采用RT-qPCR法和Western Blot法檢測胎盤PPARG, FABP4,FAT/CD36, FATP4mRNA和蛋白的相對表達量。采用多重線性回歸和廣義線性模型方法分析臍血血脂與胎盤脂質轉運和代謝相關基因表達的關系，采用多因素logistic回歸進行巨大兒發(fā)生的影響因素分析。數據分析應用SPSS19.0。
　　結果：⑴基線資料分析：共收集巨大兒44例和正常出生體重兒

6、45例，基線資料分析結果顯示，巨大兒組男嬰比例（81.8％ VS51.1%,χ2=9.388,P=0.003）、剖宮產比例（43.18% VS8.9%,χ2=13.652,P＜0.001）、母親分娩年齡（29.66±4.97VS27.62±3.80, t=-2.173,P=0.032）、母親孕期體重增加量（16.53±5.16VS14.11±3.97, Z=-2.475, P=0.015）均有意義地高于對照組，但兩組孕周、孕前BMI、身

7、高和孕前體重未顯示統(tǒng)計學差異。⑵臍血血脂水平分析：巨大兒組甘油三酯（TG）(Z=-2.017, P=0.044),總膽固醇（TC）(Z=-2.069, P=0.039),低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）(Z=-2.513, P=0.012),載脂蛋白A-Ⅰ（ApoA-Ⅰ）(t=2.103, P=0.039)濃度均有意義地低于對照組。⑶臍血游離脂肪酸（ NEFA）水平分析：巨大兒組臍血 NEFA濃度（273.02±134.63μmol/L

8、）有意義地低于對照組（350.03±183.82μmol/L）(t=2.158, P=0.034)。⑷臍血NEFA與血脂水平的相關分析：分析結果顯示，兩組均未發(fā)現(xiàn)NEFA與血脂水平之間存在相關。但是在巨大兒組中，臍血TC與HDL-C（r=0.852，P＜0.01）、LDL-C（r=0.813，P＜0.01）和ApoA-Ⅰ（r=0.786，P＜0.01），HDL-C與LDL-C（r=0.427，P＜0.01）和ApoA-Ⅰ（r=0.899

9、，P＜0.01），LDL-C與ApoA-Ⅰ（r=0.314， P＜0.01）以及，TG與ApoA-Ⅰ（rs=0.404，P＜0.01）均呈正相關相關。對照組除不存在TG與ApoA-Ⅰ相關外，其他相關均存在。⑸不同性別新生兒臍血血脂和NEFA水平分析：臍血TG, TC, HDL-C, LDL-C, ApoA-Ⅰ, NEFA在男女新生兒各層均未顯示兩組中有統(tǒng)計學差異。⑹血脂水平與巨大兒發(fā)生關系的多因素分析：采用多因素logistic回歸模型

10、分析顯示，在控制了新生兒性別、孕周、孕婦生產年齡、孕期體重增量之后，臍血TG濃度高(≥0.35mmol/L)為巨大兒發(fā)生的保護因素（AOR=0.332,95% CI:0.111-0.988），而長孕周（AOR=1.805,95% CI:1.119-2.911）、男性新生兒（AOR=7.565,95% CI:2.134–26.815）為巨大兒發(fā)生的危險因素。⑺胎盤脂質轉運與代謝相關因子表達分析：qPCR結果顯示，在巨大兒胎盤組織中，PPA

11、RG、FABP4、FAT/CD36 mRNA表達均高于對照組（P＜0.05），而FATP4表達在兩組中沒有統(tǒng)計學差異。Western Blot結果顯示，在巨大兒組 PPARG、FAT/CD36蛋白表達量升高(P＜0.05)，F(xiàn)ABP4、FATP4蛋白表達量也有上升趨勢，但兩組間比較差異未達到統(tǒng)計學意義。采用Spearman等級相關分析胎盤脂肪酸代謝相關因子 mRNA水平之間的相關性顯示，巨大兒組中，PPARG與 FABP4和FAT/CD

12、36，F(xiàn)ABP4與FAT/CD36均存在正相關關系。對照組中，只有FABP4與FAT/CD36存在正相關。性別分層分析顯示PPARG和FAT/CD36mRNA在男性新生兒中，巨大兒組的表達量高于對照組，但在女性新生兒中這一差異沒有統(tǒng)計學意義。FABP4和FATP4在性別分層中，巨大兒和對照組表達均未顯示統(tǒng)計學差異。⑻胎盤脂質轉運與代謝因子基因表達與巨大兒發(fā)生關系的多因素分析:采用多因素 logistic回歸分析，在控制了新生兒性別、孕周

13、、孕期體重增量之后，胎盤FAT/CD36基因 mRNA高表達（2-ΔΔCT＞1.33）為巨大兒發(fā)生的獨立危險因素（AOR=2.971,95% CI:1.031-8.567），且與孕周（AOR=1.804,95% CI:1.139-2.860）、孕期體重增量高（AOR=5.036,95% CI:1.2413–24.487）和男性新生兒（AOR=5.360,95% CI:1.630–17.628）共同影響巨大兒的發(fā)生。⑼胎盤脂質轉運與代謝相

14、關因子mRNA水平與新生兒血脂水平的相關分析：在巨大兒組中，PPARG的mRNA表達量與臍血TG含量呈負相關（rs=-0.339, P=0.032），與臍血HDL-C含量呈正相關(r=0.480, P=0.002)，但是在對照組中均未發(fā)現(xiàn)此相關。采用多重線性回歸和廣義線性模型校正了妊娠年齡、孕期增重、孕周、新生兒性別、孕前 BMI后，巨大兒胎盤 PPARG mRNA表達仍然顯著性地影響臍血HDL-C和TG水平，PPARG mRNA表達量

15、越高臍血HDL-C濃度越高（b=0.283, P＜0.001），PPARG mRNA表達量越高臍血TG濃度越低（b=-0.093, P=0.034）。
　　結論：①巨大兒臍血存在血脂代謝異常，其中尤以TG的影響最明顯。臍血TG濃度高是巨大兒發(fā)生的獨立保護因素。②巨大兒胎盤脂質轉運與代謝相關因子的表達水平與正常出生體重兒不同， FAT/CD36基因mRNA高表達為巨大兒發(fā)生的獨立危險因素。③巨大兒胎盤PPARG表達水平影響臍血中HD