山銀花活性成分檢測方法及其質量評價研究.pdf

1、山銀花為忍冬屬灰氈毛忍冬、紅腺忍冬、華南忍冬、黃褐毛忍冬的干燥花蕾或帶初開的花，具有清熱解毒、疏散風熱的功效。收錄在藥典及藥食同源產品目錄中，應用廣泛且年消耗量巨大。本文以山銀花及其相關產品為研究對象，分析了其中的多酚酸、黃酮、皂苷三類物質；然后根據(jù)其生長習性、采收季節(jié)建立了檢測其中潛在風險物質黃曲霉毒素的分析方法，并對其裂解規(guī)律以及特征碎片離子進行分析，為此類物質的無目標篩查奠定基礎；最后，采用電感耦合等離子體質譜法對山銀花藥材中重金

2、屬及微量元素進行分析，對山銀花的質量與安全方面進行初步探索與研究。主要研究內容如下：
　?。?）建立了超聲輔助提取及超高效液相色譜串聯(lián)三重四級桿質譜法同時定性定量檢測山銀花藥材中三類活性成分的方法。十四種目標物的提取參數(shù)利用Box-Behnken design法優(yōu)化，提取參數(shù)如下：62％甲醇為提取溶劑，液固比為106 mL/g，超聲功率為450 W。采用Extend C18(100 mm×2.1 mm，i.d.1.7μm)色譜柱及

3、梯度洗脫。另外，研究了多酚酸及黃酮的裂解規(guī)律并對特征碎片離子進行討論，首次提出了多酚酸同分異構體之間裂解差異及其機理。方法驗證結果顯示，各目標物在各線性范圍內線性關系良好（r2>0.9924），日內精密度及日間精密度相對標準偏差均在10%以內，回收率為84.94%~116.42%。該方法操作簡單、靈敏度高，可用于山銀花樣品的檢測。
　　（2）建立了山銀花藥材中4種真菌毒素的超高效液相色譜-串聯(lián)質譜定性定量方法，并對4種黃曲霉毒素的

4、裂解規(guī)律進行了分析討論。樣品加60%乙腈提取溶劑后超聲，加0.2 g N-丙基乙二胺凈化以除去山銀花中高含量的多酚酸，提取液吹至近干后復溶。色譜條件為：Agilent SB C18色譜柱（50 mm×2.1 mm，i.d.1.7μm）；定量方法采用內標法，以黃曲霉毒素G2的13C同位素內標物為內標。對4個化合物的裂解規(guī)律進行分析和總結，并分析了共同裂解途徑以及特征碎片離子。4種真菌毒素線性關系良好，r2不低于0.9964，空白樣品的加標

5、回收率為78.29%~92.51%。定量限能夠符合檢測要求。該方法操作簡單、靈敏度高、重現(xiàn)性好，可用于山銀花藥材中黃曲霉毒素的檢測。
　?。?）利用電感耦合等離子體質譜法（ICP-MS）檢測山銀花中 Li、Cr、V、Mn、Co、Ni等12種無機元素。樣品加硝酸和過氧化氫，經(jīng)微波消解后定容，以Ge、In、Sc等六種元素為內標，過濾后上機檢測。12種元素在各自線性范圍內線性關系良好（R>0.999），靈敏度高，可用于分析山銀花中的元素