甲狀旁腺激素促進卵巢癌細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和干細胞干性的作用機制研究.pdf

1、卵巢是女性重要的生殖器官之一，卵巢惡性腫瘤是致死率最高的婦科腫瘤，卵巢癌患者死亡人數(shù)占女性癌癥患者死亡人數(shù)的4％。甲狀旁腺激素（parathyroid hormone，PTH）是由人甲狀旁腺主細胞合成并分泌的重要的多肽類激素，它在體內(nèi)的主要作用是調(diào)節(jié)鈣磷代謝和骨轉(zhuǎn)換。本文從PTH對卵巢癌細胞上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）和干細胞干性的影響入手，探究PTH在卵巢癌細胞中的作用機制

2、。
　　本研究發(fā)現(xiàn)，PTH體外作用卵巢癌細胞SKOV3、ES2后可顯著提高細胞的增殖能力。愈傷劃痕實驗、Transwell細胞遷移實驗以及Transwell細胞侵襲實驗結(jié)果表明，PTH處理后細胞的遷移和侵襲能力顯著提高，表明PTH具有促進卵巢癌細胞增殖、遷移和侵襲能力的作用。檢測卵巢癌細胞內(nèi)EMT標(biāo)志物的表達水平發(fā)現(xiàn)，PTH處理提高了細胞內(nèi)間質(zhì)細胞標(biāo)志物N-Cadherin、Vimentin的表達，上皮細胞標(biāo)志物E-Cadheri

3、n表達量降低，EMT相關(guān)的轉(zhuǎn)錄因子Twist、Snail的表達量也增加，證實PTH具有促進卵巢癌細胞EMT的作用。
　　微球形成實驗和平板克隆形成實驗結(jié)果表明，PTH處理卵巢癌細胞后，細胞的自我更新能力顯著增強，微球形成和平板克隆形成能力顯著提高。檢測細胞內(nèi)的干細胞標(biāo)志物的表達水平發(fā)現(xiàn)，干細胞標(biāo)志物Bmi-1、Sox-2、Oct-4以及轉(zhuǎn)錄因子Slug、Nanong表達量均提高，表明PTH增強了卵巢癌細胞的干細胞干性。
　　

4、在原位腫瘤動物模型實驗中，PTH處理組的腫瘤體積和重量顯著高于對照組，表明PTH在體內(nèi)具有促進卵巢癌細胞腫瘤形成和促進腫瘤生長的作用。
　　為了探究PTH在卵巢癌細胞中的作用機制，本研究用抑制劑GSI-953阻斷Notch3信號通路或用siRNA內(nèi)源性降低Notch3表達，PTH促進卵巢癌細胞EMT和干細胞干性的作用被減弱或抑制，而阻斷其他信號通路則對PTH的作用無顯著影響，表明PTH主要通過Notch3信號通路介導(dǎo)發(fā)揮作用。綜上