MBL與高糖培養(yǎng)系膜細胞炎癥因子表達的相關性及雷公藤多苷對其干預性研究.pdf

1、研究目的：
　　1.通過體外培養(yǎng)的大鼠系膜細胞觀察高糖環(huán)境對大鼠系膜細胞甘露糖結合凝集素（ Mannose-binding lectin,MBL）和甘露糖結合凝集素相關絲氨酸蛋白酶2（MBL-associated serine protease-2，MASP2）基因及蛋白表達的影響，以及MBL對高糖培養(yǎng)下大鼠系膜細胞增殖及腫瘤壞死因子-β（Tumor necrosis factor,TNF-β）、白介素-6（Interleukin

2、-6,IL-6）、IL-8、IL-17的調節(jié)作用。
　　2.觀察雷公藤多苷干預以后，高糖培養(yǎng)下大鼠系膜細胞 MBL、MASP2及炎癥因子的表達變化情況，進一步探討雷公藤多苷對糖尿病腎病的可能保護機制。
　　研究方法：
　　20只健康SD大鼠適應性喂養(yǎng)2周后，隨機分為正常對照組10只和雷公藤多苷組10只，雷公藤多苷組給予雷公藤多苷片，按臨床成人常規(guī)用量的10倍10mg·kg-1·d-1溶解后經口灌胃，連續(xù)7天后取血清。大

3、鼠系膜細胞培養(yǎng)后通過CC K-8檢測細胞增殖情況，ELISA檢測系膜細胞培養(yǎng)上清液中炎癥細胞因子TNF-β、IL-6、IL-8、IL-17含量，RT-PCR檢測大鼠系膜細胞MBL及 MASP2 mRN A的表達，蛋白質免疫印跡（Western blot）檢測各組系膜細胞MBL及MASP2蛋白的表達。
　　實驗結果：
　　1.與對照組相比較，高糖組系膜細胞增殖能力增強，MBL可促進這一過程；
　　2.ELISA結果提示：

4、與對照組相比較，高糖組大鼠系膜細胞分泌IL-6、IL-8、I L-17和TNF-β等炎癥因子顯著增多，MBL可加重系膜細胞這些炎癥因子的分泌。
　　3.RT-PCR結果提示：與對照組相比較，高糖組大鼠系膜細胞MBL及 MASP2 mRNA的表達顯著增加，雷公藤組系膜細胞MBL及MASP2 mRNA的表達較高糖組下降。蛋白質免疫印跡結果提示：與對照組相比較，高糖組大鼠系膜細胞MBL及 MASP2蛋白的表達顯著增加，雷公藤組系膜細胞M