黃顙魚細胞培養(yǎng)研究.pdf

1、本文以黃顙魚（P．fulvidraco）為實驗材料，采用組織塊培養(yǎng)的方法，研究黃顙魚吻端、尾鰭、腎臟、心臟組織在體外培養(yǎng)環(huán)境下生長狀況并對黃顙魚繼代吻端細胞染色體核型進行了分析。黃顙魚吻端、尾鰭、腎臟、心臟組織在M199（10％FBS）培養(yǎng)基，27℃條件下進行原代培養(yǎng)，結果表明，黃顙魚吻端組織3～5 h遷出細胞，遷出時間早于其他組織。經胰酶消化法處理，吻端組織可繼代培養(yǎng)至第8代，尾鰭組織培養(yǎng)至第4代。吻端和尾鰭細胞為纖維型，腎臟細胞為上

2、皮型，心臟細胞為成纖維型。在不同溫度（15、27、37℃）、血清濃度（0、10％、20％）和培養(yǎng)基（M199、M1640、MEM）下培養(yǎng)吻端細胞，通過繪制細胞生長曲線，發(fā)現(xiàn)27℃及含有10％FBS的M199培養(yǎng)基最適于吻端細胞生長增殖。采用H33342和H．E．染色方法觀察吻端和尾鰭細胞形態(tài)，正常細胞核H33342染色淺淡，核內結構清楚，核膜光滑，染色質分布均勻；凋亡細胞的H33342染色明顯增強，胞核縮小，核膜皺縮，染色質凝聚、邊緣化