鴉膽子化學成分及藥理活性研究.pdf

1、鴉膽子為苦木科(Simaroubaceae)植物鴉膽子Brucea javanica(L.)Merr.的成熟種子，又名老鴉膽、苦榛子、苦參子等。主要分布在亞洲、印尼、澳洲的熱帶和亞熱帶，在中國主要分布在廣東、廣西。其主要化學成分有苦木內酯、黃酮、三萜及生物堿等多種類型，且這些成分具有抗腫瘤、抗瘧、抗炎、抗病毒等多種活性。特別是苦木內酯類的抗腫瘤作用，是眾多學者主要的研究對象。本課題以鴉膽子為研究對象，對其二氯甲烷部分、乙酸乙酯部分進行化

2、學成分研究，并對其化學成分進行活性測定。
　　目的:本課題以鴉膽子為研究對象，對其所含化學成分進行全面研究，通過熱提取法對其進行提取，柱分離色譜、制備薄層色譜、葡聚糖凝膠柱色譜等對其進行分離純化來得到單體化合物。應用UV、1D及2D NMR、MS等波譜技術對單體化合物進行結構鑒定，并采用MTT法對化合物進行體外抗腫瘤活性測定。通過系統(tǒng)的提取、分離、結構鑒定及活性測定，來完成對鴉膽子所含成分及其活性的研究。
　　方法:鴉膽子原

3、藥材12Kg通過95％工業(yè)乙醇熱回流提取后，經石油醚、二氯甲烷及乙酸乙酯依次萃取，共得到三部分。其中二氯甲烷部分和乙酸乙酯部分采用硅膠柱色譜法、制備薄層色譜法、葡聚糖凝膠柱色譜法及反相硅膠柱色譜法進行反復分離純化。得到的化合物經過UV、1D及2D NMR(1H-NMR、13C-NMR、1H-1H COSY、HMBC、HMQC、NOESY、ROESY)、MS等波譜學方法進行結構鑒定。最后采用MTT法測定化合物3、4、15對三種人肝癌細胞B

4、el-7402、SMMC-7721和Hep G2的抗腫瘤活性，用阿霉素、順鉑、紫杉醇、甲氨蝶呤作對照。
　　結果:通過對鴉膽子進行的系統(tǒng)提取分離，共得到27個化合物，鑒定了其中23個化合物的結構，包括9個苦木內酯類化合物:bruceine A（化合物3），bruceine B（化合物4），(+)-dehydrobruceantinol(化合物10)，bruceantinol(化合物11)，bruceaketolic acid(化合

5、物12)，bruceine C(化合物15)，bruceine D(化合物16)，yadanzioside G(化合物17)，dehydrobruceine B(化合物22);5個甾醇類化合物:豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷(β-stigmasteryl3-O-β-D-glucopyranoside)（化合物1），β-谷甾醇-β-D-葡萄糖苷(β-sitosterylβ-D-glucoside)（化合物2），β-谷甾醇(β-sitos

6、terol)（化合物5），豆甾-4，22-二烯-3β，6β-二醇(stigmasta-4，22-diene-3β，6β-diol)（化合物8），7-羥基-豆甾醇(7-hydroxy-stigmasterol)（化合物9）;3個黃酮類化合物:木犀草素(luteolin)（化合物18），金圣草黃素(chrysoeriol)(化合物19)，芹菜素(apigenin)(化合物20);3個苯甲酸酯類化合物:香草酸(vanillic acid)(化

7、合物14)，紫丁香酸(syringic acid)(化合物21)，沒食子酸甲酯(gallincin)(化合物24);2個含氮化合物:吲哚-3-甲醛(1H-indole-3-carboxaldehyde)（化合物7），2，4-嘧啶二酮(2，4-dihydroxy pyrimidine)(化合物26)及一個含苯化合物:dehydrochebulic acid trimethyl ester(化合物23)。
　　MTT體外抗腫瘤活性實驗

8、結果顯示化合物3、4、15對三種腫瘤細胞株(Bel-7402，SMMC-7721和Hep G2細胞株)均有抑制作用。結果顯示，在被含化合物3(濃度為100μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，Bel-7402細胞株存活率約為25％，SMMC-7721細胞株存活率低于5％，Hep G2細胞株存活率均為50％。在被含化合物4(濃度為100μmol/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，三種細胞的存活率分別約為15％，5％，50％。在被含化合物15(濃度為100μmo

9、l/L)的培養(yǎng)基培養(yǎng)后，三種細胞的存活率分別約為20％，5％，50％。
　　結論:通過對鴉膽子的系統(tǒng)分離，最終從中分離得到27個化合物，其中已鑒定23個結構，化合物1、2、7、8、9、20、24、26為首次從鴉膽子中分離得到。通過MTT體外抗腫瘤活性實驗表明化合物3、4、15對三種腫瘤細胞(Bel-7402，SMMC-7721和Hep G2)均有抑制作用。特別是對SMMC-7721細胞株，分別在三種化合物作用下，細胞的存活率均低于