基于UPLC-TOF-MS研究參麥方配伍的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制.pdf

1、本文以中藥方劑參麥方為研究對(duì)象，采用超高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜（UPLC-TOF-MS）聯(lián)用技術(shù)，研究人參與麥冬配伍增效減毒的物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制。首先進(jìn)行了體外研究，觀察人參與麥冬按照不同比例配伍后，麥冬對(duì)人參中人參皂苷成分溶出的影響，從化學(xué)層次探討兩藥配伍后化學(xué)成分的改變。其次，為了進(jìn)一步研究?jī)伤幣湮閷?duì)體內(nèi)內(nèi)源性物質(zhì)的改變，運(yùn)用代謝組學(xué)的方法，以健康SD大鼠為受試對(duì)象，通過主成分分析（principal component anal

2、ysis，PCA）和正交偏最小二乘判別分析（orthogonal partial least squares discriminant analysis，OPLS-DA）尋找尿液中差異性代謝物，變量重要性投影（Variable importance in projection，VIP）及t檢驗(yàn)篩選潛在內(nèi)源性標(biāo)志物，分析相關(guān)代謝通路，探討了參麥方在體內(nèi)的作用機(jī)制。最后，為了更好的解釋參麥方在臨床運(yùn)用中治療疾病的作用機(jī)制，課題組將參麥方用于

3、心肌損傷病理模型的研究，運(yùn)用代謝組學(xué)的方法，阿霉素(doxorubicin，DOX)造成的心肌損傷大鼠模型，采用偏最小二乘判別分析（partial least squares discriminant analysis，PLS-DA）和正交偏最小二乘判別分析尋找尿液中具有顯著性差異的代謝物，分析相關(guān)代謝通路，揭示了參麥方在疾病模型中發(fā)揮藥效的途徑和相關(guān)機(jī)制。
　　結(jié)果顯示，人參與麥冬配伍后，二醇型人參皂苷Rb1、Rb3、Rd及其丙

4、二酸甲?；苌锏娜艹隽勘壤碚撝翟龃螅夹腿藚⒃碥誖g1、人參皂苷F3以及人參皂苷Ro溶出量比理論值降低，說明人參與麥冬配伍后產(chǎn)生了藥物的相互作用，改變了人參中某些人參皂苷成分的溶出量，這可能是人參配伍麥冬作用增效減毒的物質(zhì)基礎(chǔ)。而在參麥方對(duì)于健康大鼠尿液的代謝組學(xué)研究中，共鑒定出甲基腺嘌呤、4，6-二羥基喹啉、對(duì)甲酚葡萄糖醛酸等在內(nèi)的16種內(nèi)源性代謝物，涉及色氨酸、組氨酸、苯丙氨酸酪氨酸等氨基酸代謝，脂肪酸代謝、嘌呤代謝以及能量代謝

5、等通路，表明參麥方可通過影響機(jī)體部分代謝通路而改變生理功能進(jìn)而發(fā)揮功效。在參麥方對(duì)由阿霉素所引起的心肌損傷的保護(hù)作用研究中，共鑒定出包括琥珀酰腺苷、苯丁酰谷氨酰胺、S-三甲基丁酰基二氫硫辛酰胺等在內(nèi)的14種內(nèi)源性代謝物，表明參麥方是通過調(diào)節(jié)嘌呤代謝、部分氨基酸代謝、脂肪代謝以及能量代謝來發(fā)揮保護(hù)心肌損傷作用的。
　　綜上所述，本研究通過探討人參與麥冬配伍，一方面闡明了兩藥配伍增效的物質(zhì)基礎(chǔ)，另一方面，從代謝的角度解釋了參麥方對(duì)于改