脂肪酸代謝相關基因多態(tài)性與非酒精性脂肪性肝病及其血清脂肪酸變化的關聯研究.pdf

1、非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)是指除外酒精和其他明確的損肝因素所致，以彌漫性肝細胞大泡性脂肪變?yōu)橹饕卣鞯呐R床病理綜合征，與胰島素抵抗(insulin resistance,IR)和遺傳易感密切相關。由于尚無有效的治療方法，NAFLD主要以預防為主。因此，研究NAFLD的易感基因，預測個體NAFLD發(fā)病風險，指導高危人群制定合理的膳食對NAFLD的預防具有重要意義。

2、r>　　脂肪酸在NAFLD的發(fā)生發(fā)展過程中起著重要作用，不同種類的脂肪酸具有不同的生理功能，對肝細胞的脂毒性也不相同。NAFLD時體內脂肪酸特別是具有重要生物學意義的n-3和n-6多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acids,PUFAs)的構成比例發(fā)生了怎樣的改變？哪些種類的脂肪酸為NAFLD的保護性因素？哪些種類的脂肪酸為NAFLD的危險性因素？這些問題值得深入研究。
　　單核苷酸多態(tài)性(single

3、nucleotide polymorphisms,SNPs)作為第三代遺傳多態(tài)性標記，廣泛存在于人類基因組中。SNP無論發(fā)生在基因的編碼區(qū)還是非編碼區(qū)，都有可能導致基因的表達差異。脂代謝異常與脂肪酸生物合成和β-氧化分解途徑平衡的破壞密切相關，而這兩條途徑中參與催化反應的關鍵酶是重要的影響因素。那么編碼這些關鍵酶的基因是否具有NAFLD的SNP易感位點？這些SNP位點是否對會對該基因的表達產生影響？是否與NAFLD狀態(tài)下脂肪酸組成譜的改

4、變相關呢？
　　本研究以中國北方漢族人群為研究對象，首先采用毛細管氣相色譜法檢測分析NAFLD人群血清脂肪酸譜的改變，選出與NAFLD關系密切的脂肪酸作為研究的靶點，探討脂肪酸代謝相關基因的SNP與NAFLD易感性，NAFLD時脂肪酸代謝異常三者之間的關系，以期闡明基因多態(tài)性與脂肪酸代謝異常在NAFLD發(fā)生發(fā)展中的作用，為臨床篩選NAFLD高危人群，預測個體發(fā)病風險以及制定合理的膳食指導和藥物治療方案提供實驗依據和理論基礎。

5、>　　第一部分：非酒精性脂肪性肝病人群血清脂肪酸譜及去飽和酶活性分析
　　目的：
　　了解NAFLD患者體內脂肪酸代謝改變情況以及去飽和酶△5D和△6D(PUFAs合成的限速酶)的活性變化，為研究NAFLD時脂肪酸代謝紊亂機制尋找靶點。
　　方法：
　　選擇符合條件的研究對象共866例，按照病例對照研究分組(健康人421例，NAFLD患者445例)，測量腰圍(waist circumference,WC)、收縮壓

6、(systolic blood pressure,SBP)及舒張壓(diastolic blood pressure,DBP)，計算體重指數(body mass index,BMI)；收集空腹血清，測定空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、空腹胰島素(fasting insulin,FINS)、甘油三酯(triglycerides,TG)、總膽固醇(total cholesterol,TC)、高密度脂蛋白膽固醇

7、(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(low-density lipoprotein cholesterol,LDL-C)、總游離脂肪酸(free fatty acids,FFAs)及丙氨酸氨基轉移酶(alanine aminotransferase,ALT)、門冬氨酸氨基轉移酶(aspartate aminotransferase,AST)、γ-谷氨酰轉肽酶(ga

8、mma-glutamyl transpeptidase,GGT)，用高效氣相色譜法測定所有受試者空腹血清中主要的14種脂肪酸，先進行單因素分析，再用非條件Logistic回歸分析校正混雜因素，分析血清脂肪酸組分變化與NAFLD患病風險的關聯性，并用多元線性回歸分析血清脂肪酸組分與TG、TC以及HOMA-IR的關聯性。
　　結果：
　　1.一般情況及生化指標
　　NAFLD組與健康對照組(Con組)年齡差別無統計學意義(

9、P=0.631)；NAFLD組男性比例高于Con組(42.7％vs33.0%, P=0.003)；與Con組相比，NAFLD組的BMI、WC、SBP、DBP明顯高于Con組，P<0.001。
　　與Con組相比，NAFLD組FBG、TC、TG、LDL-C、ALT、AST、GGT均明顯增高，HDL-C明顯降低，P<0.001；通過公式計算得NAFLD組胰島素抵抗指數(HOMA-IR)明顯增加，P<0.001。血清總 FFAs明顯增加

10、(2.09±0.46 mmol/L vs0.82±0.21 mmol/L)，P<0.001。
　　2.血清脂肪酸組分變化與NAFLD患病風險的關聯性
　　與Con組相比，NAFLD組C16:0、C16:1n-7、C18:1n-9、C18:3n-3(α-linolenic acid,ALA)、總單不飽和脂肪酸(monounsaturated fatty acids,MUFAs)及總長鏈脂肪酸(long-chain fatty

11、acids, LCFAs)百分含量明顯增加，校正混雜因素后與NAFLD的患病風險呈正相關，是NAFLD的危險因素，P<0.01。
　　與Con組相比，NAFLD組 C18:0、C20:0、C22:0、C24:0、C18:2n-6(linoleic acid,LA)、C20:4n-6(arachidonic acid, AA)、C22:6n-3(docosahexenoic acid, DHA)、總n-6 PUFAs、總n-3 PU

12、FAs和極長鏈脂肪酸(very long-chain fatty acids,VLCFAs)的百分含量明顯下降，校正混雜因素后與NAFLD的患病風險呈負相關，是NAFLD的保護因素，P<0.01。
　　與Con組相比，NAFLD組C22:4n-6(Docosatetraenoic acid,DTA)百分含量下降，但校正混雜因素后與NAFLD的患病風險無相關性。與Con組相比，NAFLD組 C20:5n-3(eicosapentae

13、noic acid,EPA)、C22:5n-3(docosapentaenoic acid,DPA)、總飽和脂肪酸（saturated fatty acid,SFAs），總不飽和脂肪酸(unsuaturated fatty acids，UFAs)、SFAs/UFAs和n-6/n-3比值沒有明顯變化，與NAFLD的患病風險無相關性。
　　用AA/LA和EPA/ALA的比值表示n-6和n-3 PUFAs合成途徑△5D和△6D的總活性。

14、與Con組相比，NAFLD組AA/LA和EPA/ALA明顯降低，校正混雜因素后與NAFLD的患病風險呈負相關，是NAFLD的保護因素，P<0.01。
　　3.血清脂肪酸組分與血脂以及HOMA-IR的關聯性
　　C16:0、C18:1n-9、ALA、總MUFAs、總LCFAs與TG呈正相關，P<0.001；C18:0、LA、C20:0、DTA、DHA、C24:0、總n-6 PUFAs、總n-3 PUFAs、總VLCFAs和EP

15、A/ALA與TG呈負相關，P<0.01。
　　C16:1n-7與TC呈正相關，P<0.001；C18:0、DTA、DHA、總VLCFAs與TC呈負相關，P<0.05。
　　C16:0、C18:1n-9、總MUFAs與HOMA-IR呈正相關，P<0.05；C18:0、LA、總n-6 PUFAs與HOMA-IR呈負相關，P<0.01。
　　小結：
　　1.C16:0、C16:1n-7、C18:1n-9、C18:3n-

16、3(ALA)與NAFLD的患病風險呈正相關，高水平的上述脂肪酸是NAFLD的危險因素；C18:0、C20:0、C22:0、C24:0、C18:2n-6(LA)、C20:4n-6(AA)、C22:6n-3(DHA)與NAFLD的患病風險呈負相關，高水平的上述脂肪酸是NAFLD的保護因素。
　　2.NAFLD人群血清AA和DHA的含量降低與n-6和n-3 PUFAs合成途徑去飽和酶總活性下降有關。
　　第二部分：FADS1-FA

17、DS2基因多態(tài)性與非酒精性脂肪性肝病及其血清PUFAs變化的關聯性研究
　　目的：
　　探討FADS1-FADS2基因簇的單核苷酸多態(tài)性與NAFLD患病風險及其血清PUFAs之間的相關性。
　　方法：選擇符合條件的研究對象866例(入選和排除標準同第一部分研究)，收集外周血，提取DNA，用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(Matrix Assisted Laser Desorption/ionization Time

18、of Flight Mass Spectrometry，MALDI-TOF MS)實驗平臺進行DNA的SNPs分型。先進行單因素分析，再用非條件Logistic回歸分析校正混雜因素，分析FADS1-FADS2基因簇的rs174545、rs2072114、rs174602和rs174616四個SNP位點及其構建出的單體型與NAFLD易感性以及NAFLD狀態(tài)下血清PUFAs和血脂變化的關聯。
　　結果：
　　1.FADS1-FA

19、DS2基因簇各SNPs位點分型結果
　　河北地區(qū)漢族人群中，FADS1基因存在rs174545位點， FADS2基因存在rs2072114、rs174602和rs174616位點。
　　2.FADS1-FADS2基因簇各SNPs位點等位基因頻率分析
　　FADS2基因rs174602位點次要等位基因G在NAFLD組的頻率(0.184)明顯低于Con組(0.235)，攜帶 rs174602位點次要等位基因 G的個體NAF

20、LD患病風險下降，OR值為0.735(95%CI=0.582-0.927，P=0.009)。與Con組比較，NAFLD組FADS1基因rs174545位點，FADS2基因rs2072114和rs174616位點的等位基因頻率差異不明顯，均無統計學意義。
　　3.FADS1-FADS2基因簇各SNPs位點基因型與NAFLD發(fā)病風險的相關性
　　FADS2基因rs174602位點與NAFLD的易感性存在負相關。在共顯性模型下，攜

21、帶rs174602 AG或rs174602 GG基因型的個體NAFLD的患病風險低于攜帶rs174602 AA基因型的個體(AG vs AA:OR=0.728,95%CI=0.537-0.986,P=0.041;GG vs AA: OR=0.389,95%CI=0.171-0.885, P=0.024)；在顯性模型下，與攜帶rs174602 AA基因型的個體比較，攜帶rs174602(AG+GG）基因型的個體發(fā)生NAFLD的風險降低，O

22、R值為0.657(95%CI=0.492-0.878，P=0.013)；在隱性模型下，與攜帶rs174602(AA+AG)基因型的個體比較，攜帶rs174602 GG基因型的個體發(fā)生NAFLD的風險降低，OR值為0.317(95%CI=0.131-0.767,P=0.021)。
　　FADS1基因rs174545位點，FADS2基因rs2072114和rs174616位點與NAFLD的發(fā)病風險無關聯，在3種分析模型下差異均無統計學

23、意義。
　　4.FADS1-FADS2基因簇各SNPs位點單體型的構建與分析
　　rs174545，rs2072114和rs174602三個SNP位點間分別存在較強的LD(D′>0.5)，構成的MiA單體型GGG與NAFLD的易感性相關，為NAFLD的保護因素(OR=0.702,95%CI=0.519-0.949, P=0.021)，攜帶MiA單體型GGG的個體NAFLD發(fā)病風險較低。其構成的其余5種單體型頻率在Con組和N

24、AFLD組中的分布差異不明顯，與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。
　　5.rs174602A>G突變對PUFAs和血脂影響的分析
　　按照顯性模型分別對Con組和NAFLD組中攜帶rs174602AA基因型和攜帶rs174602（AG+GG）基因型的個體血清PUFAs百分含量，AA/LA和EPA/ALA比值以及血脂(TG、TC)的差異進行了分析。結果顯示：在Con組中，與攜帶rs174602 AA基因型的個體比較，攜帶rs174

25、602(AG+GG)基因型的個體LA升高，P<0.01；AA降低，AA/LA比值降低，P<0.001；在NAFLD組中，與攜帶rs174602AA基因型的個體比較，攜帶rs174602(AG+GG)基因型的個體LA、EPA/ALA比值升高，P<0.05；AA、TC降低， AA/LA比值下降，P<0.05。對n-3系PUFAs沒有影響。
　　6.FADS1-FADS2基因簇的MiA單體型GGG對PUFAs和血脂影響的分析
　　

26、按照是否攜帶MiA單體型GGG分別對Con組和NAFLD組中攜帶MiA單體型GGG的個體和不攜帶MiA單體型GGG的個體血清PUFAs百分含量，AA/LA和EPA/ALA比值以及血脂(TG、TC)的差異進行了分析。結果顯示：在Con組中，與不攜帶MiA單體型GGG的個體比較，攜帶MiA單體型GGG的個體LA升高，P<0.05；AA、AA/LA比值降低，P<0.001。在NAFLD組中，與不攜帶MiA單體型GGG的個體比較，攜帶MiA單體

27、型GGG的個體LA升高，P<0.05；AA、TC、AA/LA比值降低，P<0.05。
　　小結：
　　1.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現FADS2基因的rs174602位點與NAFLD的易感性負相關，rs174602次要等位基因G為NAFLD的保護性因素，并且隨著次要等位基因G的積累，個體發(fā)生NAFLD的風險逐漸下降。
　　2.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現 FADS1-FADS2基因簇由rs174545-rs2072

28、114-rs174602的次要等位基因構成的MiA單體型GGG與NAFLD的易感性負相關，為NAFLD的保護性因素。
　　第三部分：過氧化物酶體脂肪酸β-氧化關鍵酶基因多態(tài)性與非酒精性脂肪性肝病及其血清VLCFAs變化的關聯性研究
　　目的：
　　探討過氧化物酶體脂肪酸β-氧化關鍵酶(ACOX1、EHHADH、ACAA1、ACOX2、HSD17B4、SCP2)的單核苷酸多態(tài)性與 NAFLD患病風險及其血清VLCFAs之

29、間的相關性。
　　方法：
　　選擇符合條件的研究對象866例(入選和排除標準同第一部分研究)，收集外周血，提取DNA，用基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(Matrix Assisted Laser Desorption/ionization Time of Flight Mass Spectrometry，MALDI-TOF MS)實驗平臺進行DNA的SNPs分型。先進行單因素分析，再用非條件Logistic回歸分析校正混雜

30、因素，分析6個過氧化物酶體脂肪酸β-氧化關鍵酶(ACOX1、EHHADH、ACAA1、ACOX2、HSD17B4、SCP2)的17個SNP位點及其構建出的單體型與NAFLD易感性以及NAFLD狀態(tài)下血清VLCFAs和血脂變化的關聯。
　　結果：
　　1.過氧化物酶體脂肪酸β-氧化體系關鍵酶基因各SNPs位點基因分型結果
　　在河北地區(qū)漢族人群中，ACOX1基因存在rs12430、rs7219716和rs8065144位

31、點，EHHADH基因存在rs4687136、rs2160815、rs1509501和rs2284994位點，ACAA1基因存在rs156265和rs2239621位點，ACOX2基因存在rs4317122、rs4681689和rs4387990位點，HSD17B4基因存在rs2075698、rs3756513、rs10064000和rs3797371位點。SCP2基因的rs3766765位點分型失敗。
　　2.過氧化物酶體β-氧化

32、體系關鍵酶基因各SNPs位點等位基因頻率分析
　　ACOX1基因rs12430位點次要等位基因T在NAFLD組的頻率(0.08)明顯低于Con組(0.11)，攜帶rs12430位點次要等位基因T的個體NAFLD患病風險下降，是攜帶 rs12430位點主要等位基因 C個體的0.698倍(95%CI=0.505-0.966，P=0.029)。
　　與Con組比較，NAFLD組ACOX1基因rs7219716和rs8065144位

33、點，EHHADH基因rs4687136、rs2160815、rs1509501和rs2284994位點，ACAA1基因rs156265和rs2239621位點，ACOX2基因rs4317122、rs4681689和rs4387990位點以及HSD17B4基因rs2075698、rs3756513、rs10064000和rs3797371位點的等位基因頻率差異不明顯，均無統計學意義(P>0.05)。
　　3.過氧化物酶體β-氧化體系

34、關鍵酶基因各SNPs位點基因型與NAFLD發(fā)病風險的相關性
　　ACOX1基因rs12430位點與NAFLD的易感性存在相關。在共顯性模型下，與攜帶rs12430主要等位基因純合子基因型CC的個體比較，攜帶rs12430 CT基因型的個體NAFLD的患病風險降低(OR=0.696,95%CI=0.489-0.990,P=0.044)；在顯性模型下，與攜帶rs12430 CC基因型的個體比較，攜帶rs12430(CT+TT)基因型的

35、個體發(fā)生 NAFLD的風險降低，OR值為0.575(95%CI=0.340-0.972,P=0.039)。
　　ACAA1基因rs156265位點與NAFLD的易感性存在相關。在共顯性模型下，與攜帶rs156265主要等位基因純合子基因型CC的個體比較，攜帶rs156265次要等位基因純合子基因型GG的個體NAFLD的患病風險升高(OR=1.634,95%CI=1.051-2.541,P=0.029)。在隱性模型下，與攜帶rs15

36、6265(CC+CG)基因型的個體比較，攜帶rs156265 GG基因型的個體發(fā)生NAFLD的風險變化更高，OR值為OR=1.809(95%CI=1.191-2.748,P=0.005)。
　　ACOX1基因的rs7219716和rs8065144，EHHADH基因的rs4687136、rs2160815、rs1509501和rs2284994，ACAA1基因的rs2239621，ACOX2基因的rs4317122、rs46816

37、89和rs4387990，HSD17B4基因的rs2075698、rs3756513、rs10064000和rs3797371共十四個位點與NAFLD的發(fā)病風險無關聯，在3種分析模型下差異均無統計學意義。
　　4.過氧化物酶體β-氧化體系關鍵酶基因各SNPs位點單體型的構建與分析
　　ACOX1基因的rs12430、rs7219716和rs8065144三個SNP位點間分別存在較強的LD(D′>0.5)，其構成的單體型CCG

38、在NAFLD組的頻率(0.073)明顯高于Con組(0.045)，為NAFLD的危險因素(OR=1.639,95%CI=1.086-2.473,P=0.018)，攜帶單體型CCG的個體NAFLD發(fā)病風險增高。其構成的其余4種單體型頻率在Con組和NAFLD組中的分布差異不明顯，與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。
　　EHHADH基因rs4687136、rs2160815、rs1509501和rs2284994四個SNP位點構建的5種單

39、體型與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。ACAA1基因的rs156265和rs2239621兩個SNP位點構建的3種單體型與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。ACOX2基因的rs4317122、rs4681689和rs4387990三個SNP位點構建的6種單體型與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。HSD17B4基因的rs2075698、rs3756513和rs10064000三個位點構建的4種單體型與NAFLD的發(fā)病風險無關聯。
　　5.rs124

40、30 C>T突變對VLCFAs和血脂影響的分析
　　按照顯性模型分別對Con組和NAFLD組中攜帶rs12430 CC基因型和攜帶rs12430(CT+TT)基因型的個體血清VLCFAs百分含量及血脂(TG、TC)的差異進行分析，結果顯示：在Con組中，與攜帶rs12430 CC基因型的個體比較，攜帶rs12430(CT+TT)基因型的個體血清VLCFAs百分含量以及TG、TC變化不明顯，差異無統計學意義。在NAFLD組中，與攜帶

41、rs12430 CC基因型的個體比較，攜帶rs12430(CT+TT)基因型的個體TC降低，P<0.05；對其他VLCFAs百分含量以及TG沒有影響。
　　6.rs156265 C>G突變對VLCFAs和血脂影響的分析
　　按照共顯性模型分別對Con組和NAFLD組中攜帶rs156265 CC基因型、攜帶 rs156265 CG基因型和攜帶rs156265 GG基因型的個體血清VLCFAs百分含量及血脂(TG、TC)的差異進

42、行分析，結果顯示：在Con組中，攜帶rs156265 CC基因型，攜帶rs156265 CG基因型和攜帶rs156265 GG基因型的個體血清VLCFAs百分含量以及TG、TC變化不明顯，三組間差異均無統計學意義。在NAFLD組中，與攜帶rs156265 CC基因型的個體比較，攜帶rs156265 GG基因型的個體C22:0、DPA降低，P<0.05；其余VLCFAs百分含量以及TG、TC變化不明顯，三組間差異無統計學意義。
　　

43、7.ACOX1基因的單體型CCG對VLCFAs和血脂影響的分析
　　按照是否攜帶單體型CCG分別對Con組和NAFLD組中攜帶單體型CCG的個體和不攜帶單體型CCG的個體血清VLCFAs百分含量以及血脂(TG、TC)的差異進行了分析。結果顯示：在Con組中，與不攜帶單體型CCG的個體比較，攜帶單體型CCG的個體DTA降低，P<0.05；對其他VLCFAs百分含量以及TG、TC沒有影響；在NAFLD組中，與不攜帶單體型CCG的個體比

44、較，攜帶單體型CCG的個體DTA、DHA、總VLCFAs降低，P<0.05；對其他VLCFAs百分含量以及TG、TC沒有影響。
　　小結：
　　1.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現ACOX1基因的rs12430位點與NAFLD的易感性負相關，rs12430次要等位基因T為NAFLD的保護性因素。
　　2.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現ACOX1基因由rs12430-rs7219716-rs8065144構成的單體型CCG

45、與NAFLD的易感性正相關，為NAFLD的危險因素。
　　3.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現ACAA1基因的rs156265位點與NAFLD的易感性正相關，rs156265次要等位基因純合子基因型 GG為NAFLD的危險因素。
　　第四部分：單核苷酸多態(tài)性對過氧化物酶體脂肪酸β-氧化關鍵酶基因表達的影響
　　目的：
　　從基因表達角度探討rs156265 C>G影響NAFLD發(fā)病風險的分子機制
　　方法：<

46、br>　　提取人全血總 RNA，分離外周血白細胞，檢測攜帶 rs156265不同基因型個體ACAA1在mRNA和蛋白水平的表達。
　　結果：
　　1.攜帶rs156265不同基因型的個體ACAA1 mRNA的表達變化
　　ACAA1mRNA在人外周血白細胞有低水平的表達。
　　正常人群中，攜帶rs156265 CC基因型，攜帶rs156265 CG基因型和攜帶rs156265 GG基因型的個體外周血白細胞中ACA

47、A1 mRNA的相對表達量變化不明顯，三組間差異均無統計學意義(P＞0.05)。
　　NAFLD人群中，攜帶rs156265 CC基因型，攜帶rs156265 CG基因型和攜帶rs156265 GG基因型的個體外周血白細胞中ACAA1 mRNA的相對表達量變化不明顯，三組間差異均無統計學意義。
　　2.攜帶 rs156265不同基因型的個體 ACAA1蛋白(PTH1)水平的表達變化
　　Western blot結果顯示

48、，與攜帶rs156265 CC基因型的個體比較，攜帶rs156265 CG和GG基因型的個體外周血白細胞中PTH1蛋白含量均明顯減少。
　　小結：
　　1.攜帶rs156265(CG+GG)基因型的個體ACAA1基因蛋白水平表達下降。
　　2.ACAA1蛋白水平下降可能與攜帶rs156265 GG基因型的NAFLD人群C22:0的降低無關。
　　結論：
　　1.C16:0、C16:1n-7、C18:1n-9

49、、C18:3n-3(ALA)與NAFLD的患病風險呈正相關，是 NAFLD的危險因素；C18:0、C20:0、C22:0、C24:0、C18:2n-6(LA)、C20:4n-6(AA)、C22:6n-3(DHA)與NAFLD的患病風險呈負相關，是NAFLD的保護因素。
　　2.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現 FADS2基因的rs174602和ACOX1基因的rs12430與NAFLD的易感性負相關，rs174602次要等位基因G和

50、rs12430次要等位基因T為NAFLD的保護性因素；ACAA1基因的rs156265與NAFLD的易感性正相關，rs156265次要等位基因純合子基因型GG為NAFLD的危險因素。
　　3.在中國北方漢族人群中，首次發(fā)現FADS1-FADS2基因簇的MiA單體型GGG(rs174545-rs2072114-rs174602)與NAFLD的易感性負相關，為NAFLD的保護性因素；ACOX1基因的單體型CCG(rs12430-rs7