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文檔簡介
1、目的:應用雙向凝膠電泳蛋白質分離技術(2-DE)及凝膠圖像對比分析,對結腸黑變病(MC)、結腸癌及正常組織進行蛋白質分離,尋找三者差異表達的蛋白質點,以探索MC的發(fā)生、發(fā)展及其與結腸癌的相關性。
方法:
1.采集該院內鏡室2013.01-2014.06就診患者的結腸組織標本,分為MC組7例、結腸癌組6例及正常對照組6例;
2.結腸組織樣品處理后,取上清液用 Bradford方法測定蛋白質濃度;應用2-DE技
2、術進行第一向固相 pH梯度等電聚焦電泳(IPG-IEF)及第二向十二烷基硫酸鈉-聚丙酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)建立 MC、結腸癌及正常人結腸組織的雙向凝膠圖譜。
3.應用掃描儀對凝膠掃描獲取圖像,使用 imagemaster7.0軟件分別分析對比MC患者與結腸癌患者及正常人的凝膠圖像,篩選出差異表達蛋白質點。
結果:
1.獲取的凝膠圖像顯示出良好的重復性。各斑點間分離清晰,各組內凝膠在蛋白質斑點位置上
3、均具有較好的重復性,可以進行圖像分析;
2.結腸癌、MC、正常組織凝膠圖像的平均蛋白質斑點數(shù)分別為2150±240,1970±138,2028±176。凝膠圖譜進行比對后,總共找到置信度在95%以上的差異點14個。MC與正常組織對比有6個差異點,其中4個蛋白點在正常組織中表達量較大,2個點在MC中表達量比較大。僅在MC中表達的蛋白質點有1個;MC與結腸癌組織對比有8個差異點,其中1個蛋白點在MC中的表達量比較大,7個蛋白點在結
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