兩相系統(tǒng)發(fā)酵轉化植物甾醇為雄烯二酮的研究.pdf

1、雄甾-4-烯-3，17-二酮(androst-4-ene-3，17-dione,簡稱雄烯二酮或4AD)是許多甾體藥物合成的關鍵中間體，是生產(chǎn)諸如類皮質激素、性激素、蛋白同化激素等甾體類激素藥物的重要原材料之一。目前，國內外對甾體藥物的需求量非常大，因此，雄烯二酮具有廣闊的市場前景。 微生物轉化法生產(chǎn)雄烯二酮具有生產(chǎn)周期短，產(chǎn)品穩(wěn)定性高，副產(chǎn)物少，環(huán)境污染小等優(yōu)點；但也存在底物投料量低，雄烯二酮轉化率不高和產(chǎn)物有反饋抑制作用等不足

2、。 本研究通過構建有機相一水兩相發(fā)酵系統(tǒng)，實現(xiàn)增大底物的投料濃度和解除產(chǎn)物的反饋抑制作用，從而提高雄烯二酮的轉化率；考察了培養(yǎng)基主要成分對其發(fā)酵結果的影響，建立了一套既快速又有效的檢測方法：研究了兩相系統(tǒng)在5L發(fā)酵罐中的發(fā)酵情況，得到了最佳的罐發(fā)酵條件。 主要結論如下： 1、構建起的微生物轉化植物甾醇為雄烯二酮的最佳兩相發(fā)酵系統(tǒng)是：有機相種類是大豆油，有機相所占比例是22％，投料量為4g/L。在此條件下，植物甾醇

3、的投料量提高了3倍左右，而雄烯二酮的轉化率由原來的15.1％提高到了85.7％。 2、最佳培養(yǎng)基組成是：米糖漿濃度為70g/L，尿素的濃度為2.00g/L，F(xiàn)e2"的濃度為0.05g/L，Mg2+的濃度為O.06g/L，Ca2+的濃度為0.100g/L。在此條件下，雄烯二酮的轉化率最高，可以達到86.8％。 3、比較了薄層色譜法，紫外可見光分光光度法，高效液相色譜法，氣相色譜法四種測定微生物轉化植物甾醇為雄烯二酮發(fā)酵結果