透明質酸鈉注射與鉆孔法治療兔軟骨損傷的對比試驗.pdf

1、軟骨是由軟骨細胞與細胞外基質形成的一種透明而富有彈性的結締組織。細胞外基質由水、多糖及致密的膠原蛋白等構成，其中缺乏血管、神經和淋巴管。軟骨細胞分散其中，不斷進行基質的合成與降解，基質保護著細胞，為細胞提供養(yǎng)分，兩者相互依賴，共同維持關節(jié)結構的穩(wěn)定。由于特殊的軟骨組織結構，關節(jié)軟骨損傷修復所面臨的最大困難就是缺乏必需的未分化細胞，以至未分化的間質細胞無法通過血供進入損傷部位，進行類似其他組織的修復愈合。而且軟骨細胞包埋于基質中，因膠原一

2、蛋白多糖的致密性，從而細胞的增殖和遷移能力受到影響，因此組織自我修復能力十分有限。微小的關節(jié)軟骨創(chuàng)傷如果不采取外加手段干預治療，最初的小范圍局域性損傷將逐漸擴大，進一步惡化甚至可能引發(fā)骨關節(jié)炎。鑒于以往試驗結果都是采用不同研究組，不同模型得出，對部分軟骨損傷的治療效果，缺乏統(tǒng)一，系統(tǒng)的評估。本試驗通過建立淺層部分軟骨損傷，對比自愈、用藥、鉆孔三種方法修復效果，分析參與修復的主要成分。
　　本實驗采用18只新西蘭大白兔，體重2.5

3、kg左右。統(tǒng)一制備膝關節(jié)軟骨表層部分軟骨損傷模型，并隨機分為三個實驗組:自愈組、用藥組、鉆孔組，對不同治療方法的效果進行對比。每組6只，均分到1周、8周兩個時間點。自愈組不做任何處理、用藥組每周關節(jié)腔內注射1％透明質酸鈉0.2 mL、鉆孔組于缺損區(qū)域中間范圍內均勻鉆3個孔。對三種方法的修復效果分別進行組織病理學與基因水平的分析評估:結合LequesneMG標準，對動物運動情況進行行為學評分;采用病理學HE染色、番紅固綠染色、甲苯胺藍染色

4、方法對組織修復情況進行評估;通過RT-PCR方法對軟骨形成的過程中相關細胞因子表達水平進行檢測，主要包括:Runt相關轉換因子-2(RUNX2)、Ⅹ型膠原(COLⅩ)、Ⅰ型膠原(COLⅠ)、Ⅱ型膠原(ColⅡ)、蛋白聚糖(Aggrecan)。綜合分析，對比三種方法對軟骨損傷的修復效果。
　　結果發(fā)現(xiàn)，經過8周實驗周期，采用自體愈合、藥物注射、鉆孔進行處理的淺層部分軟骨損傷，缺損處均有修復組織生成，其中各實驗組中RUNX2表達量均高

5、于空白組水平，自愈組與用藥組間差異不顯著(P＞0.05)，鉆孔組與二者差異極顯著(P＜0.01);Ⅹ型膠原均低于正常值，與空白組差異極為顯著(P＜0.01);鉆孔組同自愈組與用藥組相比差異也極為顯著(P＜0.01);自愈組與用藥組組二者差異并不明顯(P＞0.05);Ⅰ型膠原第8周時，自愈組明顯高于空白組，與用藥組和鉆孔組差異極顯著(P＜0.01);二者低于空白組，組間差異不顯著(P＞0.05);Ⅱ型膠原8周時空白組分別同自愈組和鉆孔組相

6、比較，差異均極為顯著(P＜0.05);與用藥組相比，差異不顯著(P＞0.05);各組間差異顯著(P＜0.05);蛋白聚糖的自愈組與鉆孔組表達量低于空白組，與第1周時相比呈下降趨勢，但與空白組相比，差異不顯著(P＞0.05）;用藥組表達量仍高于空白組并略有上升，與自愈組及用藥組間差異極顯著(P＜0.01)。
　　結果表明三種方法均起到一定修復效果。但不同處理方法對缺損部位修復情況及修復物組成存在一定差異，自愈組Ⅰ型膠原構成的肉芽組織