特定理化因子對骨骼肌肌質網囊泡氧化還原系統(tǒng)的影響研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文以提取的兔骨骼肌肌質網(SR)囊泡為研究對象，探討兩種特定的理化因子(50Hz0.4mT磁場和Na+、K+生理鹽離子)對SR囊泡自由基產生機制的調控作用及其對SR上鈣釋放通道(ryanodinereceptor，RyR1)的影響，并初步考察氧化還原系統(tǒng)在SR囊泡上的具體活性位點。 實驗采用熒光分光光度計、紫外—可見分光光度計檢測兩種理化因子對SR上NADH氧化酶(NOX)活性以及伴生超氧自由基(O2-)產率的影響；采用[3

2、H]-ryanodine結合實驗、鈣釋放動力學實驗檢測兩種理化因子對SR上RyR1功能狀態(tài)的影響；利用去垢劑的作用確定NOX在SR上的位置。 結果顯示，高濃度的Na+、K+對SR上NOX活性(由NADH的氧化初速率表征)以及伴生的O2-產率均有抑制作用；在[3H]-ryanodine結合實驗中，高濃度的Na+、K+也抑制了由NADH誘導的ryanodine與RyR1結合的升高趨勢；在鈣釋放動力學實驗中，不同濃度的K+調控了由N

3、ADH誘導的Ca2+釋放初速率變化；NOX活性以及O2-產率與RyR開放程度存在正相關關系。同樣，50Hz0.4mT磁場輻照30min，有效地促進了NADH的氧化以及O2-的產生，由NADH誘導的受配體的結合能力以及RyR1的Ca2+釋放速率也在磁場作用下得以相應提高。而去垢劑作用使外源的NADH迅速進入SR囊泡膜內，不與膜外的NOX產生氧化還原反應。 由此猜測，骨骼肌肌質網囊泡上存在具有對特定理化因子敏感并中介超氧自由基產生

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