溶劑對(duì)蛋白質(zhì)ESI-MS帶電分布的影響.pdf

1、　　生物質(zhì)譜的發(fā)明給生物大分子分析帶來了一場(chǎng)革命，MALDI和ESI均能將熱不穩(wěn)定的生物大分子離子化。其中ESI-MS是最軟的離子化方法。ESI-MS能將樣品溶液通過毛細(xì)管導(dǎo)入大氣壓電離源內(nèi)，在源內(nèi)毛細(xì)管終端和反電極之間的強(qiáng)電場(chǎng)作用下，使樣品形成帶電荷的霧滴，即發(fā)生電噴霧而被離子化并進(jìn)入質(zhì)量分析器。ESI能連接四極桿、離子阱和飛行時(shí)間等多種質(zhì)量分析器。ESI串聯(lián)質(zhì)譜可以多種掃描方式對(duì)樣品進(jìn)行分析。ESI-MS常與HPLC、CE等分離手段

2、聯(lián)用。ESI-MS自發(fā)明以來，被廣泛的應(yīng)用于分析有機(jī)化合物，高分子和生物大分子。高分子質(zhì)量的蛋白質(zhì)在ESI-MS分析中，可形成甚至帶十個(gè)以上電荷的離子峰簇，因此在有限的m/z掃描范圍(50～2000Da)內(nèi)能被檢測(cè)到。同一蛋白在不同的ESI-MS分析條件下電離產(chǎn)生電荷分布不同的多電荷離子峰簇。一般的研究表明，ESI-MS中某些一級(jí)結(jié)構(gòu)類似的蛋白質(zhì)帶電分布差別巨大，變性蛋白比天然蛋白帶有更多的電荷。又有研究表明溶液的pH值對(duì)蛋白質(zhì)的帶電分

3、布影響非常小。優(yōu)化好的溶劑條件有利于獲得帶電荷數(shù)少，電荷分布集中的質(zhì)譜圖。本文使用電噴霧離子阱質(zhì)譜儀，通過在水+甲醇、水+乙腈和水+異丙醇三組溶劑中以及在不同的溶劑配比濃度下對(duì)細(xì)胞色素C(牛心)、胰島素(牛)進(jìn)行ESI-MS分析，發(fā)現(xiàn)不同的溶劑組對(duì)蛋白質(zhì)離子主要帶電荷的數(shù)量有明顯的影響。而在同一溶劑組中，溶劑的配比則對(duì)蛋白質(zhì)離子的帶電分布范圍有影響。由此可以得出結(jié)論，ESI-MS中蛋白質(zhì)的帶電分布跟氣相狀態(tài)下溶劑分子與蛋白質(zhì)的相互作用有