聚乙二醇化重組人生長激素的制備、純化、理化性質以及生物活性研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、  目的:研究單甲氧基聚乙二醇丙醛(mPEG-ALD,20KD)修飾重組人生長激素(rhGH)的最適反應條件以及修飾產物的純化方法;并以目標產物——單聚PEG-rhGH為研究對象,對其相對分子量、純度、等電點、修飾位點、二級結構、分子構象、體外受體親和力以及體內生物學活性進行了研究。方法:用SDS-PAGE分析不同反應條件對修飾反應產物的影響;用離子交換及分子篩進行分離純化;通過分子篩高效液相(SizeExclusionHPLC)、毛細

2、管等電聚焦(CIEF)、圓二色譜(CD)、質譜、以及熒光光譜等方法對單聚PEG-rhGH的純度、等電點、二級結構、相對分子量、修飾位點以及分子構象進行了研究;采用妊娠兔肝細胞膜放射受體分析法(RRA)檢測單聚PEG-rhGH的體外受體親和力;利用未成年去垂體大鼠體重增加法檢測單聚PEG-rhGH的體內生物活性。結論:確立了單甲氧基聚乙二醇丙醛修飾重組人生長激素的最適反應條件以及修飾產物的純化方法。并對單聚PEG-rhGH的相對分子量、純

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