丙烯酰胺致小鼠細胞DNA損傷及抗氧化劑的保護作用研究.pdf

1、實驗目的: 應用彗星試驗檢測丙烯酰胺(AA)染毒后小鼠多個臟器細胞DNA的損傷及損傷后的修復情況，以進一步研究AA遺傳毒性，探討AA體內(nèi)遺傳毒性可能的靶器官，比較不同細胞對AA的敏感性。并在一定劑量的維生素C和番茄紅素干預時，檢測二者對AA引起的小鼠淋巴細胞及肝細胞DNA損傷情況的影響，測定血漿及肝組織中脂質(zhì)過氧化物含量及抗氧化酶活性的改變情況，以揭示從遺傳毒性與氧化損傷之間的聯(lián)系，為從遺傳毒性機制及其預防提供一定的實驗依據(jù)。

2、 實驗方法: 1.在研究從作用的時效關(guān)系時，以50mg/kg的從給小鼠一次性腹腔注射，應用彗星試驗檢測從染毒0、3、6、12、24h后小鼠外周血淋巴細胞、骨髓、肝、肺、脾、腎及睪丸細胞的DNA損傷情況。量效關(guān)系研究中，分別以0、10、25、50mg/kg的從腹腔注射，檢測12h后不同細胞DNA的損傷。 2.為了研究抗氧化劑對從毒性的影響，分別以50mg/kg的維生素C或10mg/kg劑量的番茄紅素連續(xù)灌胃小鼠10天，

3、并從第6天開始腹腔注射從，給藥結(jié)束后測定小鼠淋巴細胞、肝細胞DNA損傷及血漿和肝組織中MDA含量、SOD酶活力的變化。 實驗結(jié)果: 1.以50mg/kg的從給小鼠腹腔注射，肝細胞在染毒后3小時，骨髓和淋巴細胞在6小時，彗星尾長、尾部DNA％及尾矩開始增加(P<0.05)，到12小時達到最大值(P<0.01)，24h時有所下降，但未恢復到對照組水平(P<0.05)；睪丸細胞在12h時損傷程度與對照組比較有顯著性差異(

4、P<0.01)；脾細胞在3h時出現(xiàn)DNA損傷，至24h時又基本恢復到對照組水平;各時間點未發(fā)現(xiàn)肺和腎臟細胞的明顯損傷(P>0.05)。 2.骨髓細胞在低劑量(10mg/kg)時，彗星各指標即對照組相開始增加(P<0.05)，淋巴細胞、肝及睪丸細胞在中劑量(25mg/kg)時，彗星指標較對照組有明顯增加(P<0.05)，并隨從劑量的加大而增大。脾細胞只在從高劑量(50mg/kg)時彗星指標才較對照組有明顯增加(P<0.05)3

5、.從染毒5天后，除出現(xiàn)淋巴細胞和肝細胞的DNA損傷外，小鼠血漿及肝組織中MDA含量升高，SOD活力下降，與陰性對照組相比差別有顯著性(P<0.05)。與AA組相比，給予維生素C或番茄紅素的小鼠，其兩種細胞彗星尾長、尾部DNA％及尾矩，都有顯著下降(P<0.05)，但仍高于陰性對照組(P<0.05)，血漿及肝組織中MDA含量均有明顯下降，SOD活力顯著升高(P<0.05)。 結(jié)論: 1.50mg/kg劑量的AA能引起

6、小鼠淋巴細胞、骨髓、肝、脾及睪丸等細胞的DNA損傷，機體對這種損傷具有一定的修復能力； 2.不同細胞對從的敏感性及DNA損傷修復能力不同； 3.AA染毒后外周血淋巴細胞在彗星試驗中的拖尾現(xiàn)象可反映體內(nèi)組織器官DNA損傷的一般情況，可將其作為監(jiān)測機體接觸從后組織細胞DNA損傷作用的生物標志。 4.AA引起的小鼠細胞DNA損傷與脂質(zhì)過氧化作用有關(guān)； 5.維生素C和番茄紅素對AA染毒小鼠的脂質(zhì)過