利用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與mPem蛋白相作用的分子.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、　　Pem基因是同源異型框基因,它的表達具有明顯的時間和組織特異性。鼠胚發(fā)育的第6天,Pem開始在胚胎中表達,第7-8天,Pem表達量達到最高,隨后迅速減少；而在胎盤和卵黃囊中,第7-8天時幾乎檢測不到Pem的轉錄,到了第9天大量表達并持續(xù)到分娩為止。Pem基因在成年組織中一般不表達,但可在生殖組織中表達,例如在附睪、睪丸和卵巢中表達。這充分表明Pem在胚胎發(fā)育和生殖組織中可能充當著重要的角色。
　　為了進一步研究Pem的功能,我

2、們利用酵母雙雜交系統(tǒng)對小鼠7天胚胎cDNA文庫進行篩選,成功的得到了3個有意義的分子：Psap、Brpf1、Cdc37。
　　Brpf1基因(bromodomain and PHD finger containing 1)含有1個保守的溴結構域(bromodomain)、兩個PHD鋅指結構和1個PWWP模序。經過初步的生物信息學分析,我們推測：在胚胎發(fā)育的特定階段和生殖組織中,mPem特異性表達。在mPem形成特定的空間結構后,B

3、rpf1的第一個PHD鋅指結構與mPem結合,兩者發(fā)生相互作用,從而使Brpf1的另一個PHD鋅指結構和bromodomain與核小體結合,構象發(fā)生變化的核小體募集轉錄相關蛋白與DNA模板上啟動子結合,促進基因轉錄,最終導致細胞分化或其他一系列事件的發(fā)生。
　　Psap(Prosaposin)基因的表達與mPem的表達在空間上相吻合,他們可能在雄性生殖器官的發(fā)生、細胞分化中起著舉足輕重的作用。
　　mPem蛋白與Cdc37伴

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