載GDNF基因的骨髓間充質干細胞促周圍神經再生的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討骨髓間充質干細胞(BMSCs)經膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(GDNF)復合綠色熒光蛋白(GFP)定向誘導向神經細胞分化及其促進大鼠外周損傷神經的再生。
　　方法:應用骨髓間充質干細胞的貼壁特性復合連續(xù)換液法獲取原代細胞，培養(yǎng)獲取純度及活力較高、形態(tài)較為統(tǒng)一的第三代細胞，第三代骨髓間充質干細胞(BMSCs)經載GDNF基因復合綠色熒光蛋白(GFP)的質粒以脂質體為介導轉染誘導分化，記錄對比細胞活力及形態(tài)學方面的變化，通過免疫

2、熒光鑒定神經元特異性烯醇化酶(NSE)的熒光表達確定轉染結果。鉗夾法統(tǒng)一建立坐骨神經損傷模型，將誘導培養(yǎng)后形態(tài)學較為良好的細胞濃縮后植入周圍神經再生室模型，術后定期觀察統(tǒng)計坐骨神經功能指數(SFI)、完整解剖實驗大鼠雙側腓腸肌稱重，測量靶肌肉濕質量率、損傷神經再生室段解剖出神經組織行自動病理圖文系統(tǒng)分析神經再生纖維、靶肌肉冰凍切片行DAPI染色觀察細胞萎縮、核凝聚狀態(tài)及形態(tài)學變化、神經損傷再生室組織取材電鏡觀察神經顯微結構變化。

3、　　結果:實驗結果證實骨髓間充質干細胞經膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子轉染誘導分化組相關數據均較未經誘導對照組顯著，這充分肯定了GDNF基因的確切作用，經膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子轉染的骨髓間充質干細胞生長活躍分化良好，神經元特異性烯醇化酶(NSE)特異表達，神經營養(yǎng)因子轉染誘導組坐骨神經掃描電鏡下超微結構再生更加明顯，細胞核染色可見實驗組能明顯抑制靶肌肉的萎縮。
　　結論:骨髓間充質干細胞(BMSCs)經膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(GDN

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