八氯苯乙烯、多溴聯(lián)苯醚等多鹵代有機污染物的半抗原合成及免疫分析.pdf

1、隨著環(huán)境污染的日益嚴重，許多新型的多鹵代有機污染物不斷被報道和檢測出來。八氯苯乙烯(OCS)、多溴聯(lián)苯醚(PBDEs)和三（2，3-二溴丙基）異氰酸酯(TBC)都是具有持久性、耐光耐熱、生物累積性的多鹵代有機污染物，并能對周邊環(huán)境和人體健康構成危害。由于缺乏相應的半抗原和抗體，目前對這三種有機污染物的檢測分析仍依賴于常規(guī)的儀器分析方法。因此本論文針對這三種多鹵代有機污染物的結構特點，設計與合成了多種半抗原化合物，為后續(xù)的免疫分析奠定了物

2、質基礎;同時本文還通過動物免疫實驗獲取了八氯苯乙烯的多克隆抗體，并建立了能選擇性識別八氯苯乙烯的酶聯(lián)免疫分析方法。本論文的主要內容如下:
　　1.通過對八氯苯乙烯進行結構分析，設計了兩條合成路線來合成保留不同特征結構的八氯苯乙烯半抗原。第一條合成路線是以五氯硝基苯為原料，通過還原、重氮化、Sonogashira等多步反應，制備了含醇羥基和烯丙基溴的前驅體化合物4和5，繼而通過對這兩個化合物進行衍生，得到了保留多氯代苯乙烯基結構的八

3、氯苯乙烯半抗原Os1～Os6;而第二條合成路線是以間硝基苯甲醛為原料，利用親電加成、消除、硝基還原等反應，獲得了保留三氯代乙烯基結構的八氯苯乙烯半抗原Os7和Os8。所有的八氯苯乙烯半抗原前驅體和目標化合物，均進行了1HNMR、13CNMR和MS表征，并得到了結構確認。
　　2.第三章的主要研究內容是建立八氯苯乙烯的酶聯(lián)免疫分析方法。作者首先篩選出了三種八氯苯乙烯半抗原，并通過活性酯法制備了人工抗原，然后對新西蘭大白兔進行免疫實驗

4、以獲取相應的多克隆抗體;繼而經(jīng)過對抗體和包被原的篩選以及免疫方法的條件優(yōu)化，最終建立了能選擇性檢測八氯苯乙烯的間接競爭ELISA分析方法。在此基礎上，再利用所建立的酶聯(lián)免疫分析方法，不僅對不同濃度的八氯苯乙烯標準液和多種干擾物進行了檢測分析，而且對不同樣品體系的加標回收率進行了考察，同時還將回收率結果與氣相分析進行了比較。
　　3.第四章中主要討論了多溴聯(lián)苯醚半抗原的設計與合成。作者首先利用親電取代反應和重氮化反應合成了多種多溴代

5、酚化合物，然后通過Chan-Lam偶聯(lián)反應，將多溴代酚與化合物26進行偶聯(lián)，得到了相應的二苯基醚化合物;再進一步通過脫保護和溴素的親電取代反應，制備了含酚羥基的半抗原前驅體;最后通過Williamson成醚反應、水解或氧化等反應，獲得了多種含脂肪羧基和不同連接臂的PBDEs半抗原分子。這些PBDEs半抗原都通過了結構表征，而且都很好的保留了多溴聯(lián)苯醚的結構特點。
　　4.第五章闡述了TBC半抗原的設計與合成。本項研究是通過以2，4

6、，6-三(烯丙氧基)-1，3，5-三嗪為原料，利用Claisen重排反應及與NaOH的成鹽反應制得了重要中間體化合物33。再通過以2-溴乙酸乙酯(4-溴丁酸乙酯或6-溴己酸乙酯)為原料，經(jīng)過親核取代反應、溴化加成及鹽酸的酸性水解反應，成功合成了含有脂肪羧基功能基及不同連接臂的TBC半抗原化合物;而含有脂肪氨基的TBC半抗原是通過Gabriel氨基合成法來獲得的。含芳香羧基和芳香胺基的TBC半抗原則是分別以對羥基苯甲醛、對羥基苯甲酸叔丁基