銀杏葉黃酮的提取及其抗腫瘤活性的研究.pdf

1、銀杏葉所含化學(xué)成分非常復(fù)雜，包括黃酮類、萜類、生物堿、多糖類、酚類、氨基酸、微量元素等。銀杏葉中黃酮類化合物含量較高，其中以槲皮素、山萘酚和異鼠李素的糖苷為主。許多實(shí)驗(yàn)已證實(shí)，銀杏葉黃酮類物質(zhì)具有非常廣泛的生理和藥理活性，如擴(kuò)張冠狀血管、抗炎癥、抗氧化、抗病毒、調(diào)節(jié)免疫功能等。本文利用超聲浸提方法分離提取了銀杏葉總黃酮，并對(duì)總黃酮及其成分之一——槲皮素的含量、兩者的抗腫瘤活性及免疫調(diào)節(jié)作用進(jìn)行了初步研究。 采用四種溶劑(水、70

2、％甲醇、70％乙醇和70％丙酮)浸提輔以超聲波處理的方法從銀杏葉磨粉中得到總黃酮，經(jīng)石油醚去色素后，利用單波長(zhǎng)分光光度法對(duì)提取物中總黃酮的含量進(jìn)行了測(cè)定。結(jié)果表明，有機(jī)溶劑的提取效率(丙酮為1.6247％，甲醇為1.3363％，乙醇為1.2451％)均比水的提取效率(1.1702％)高。用HPLC方法測(cè)定以乙醇作為溶劑提取的銀杏葉總黃酮中槲皮素的含量為0.20153％，折算為100g銀杏葉中槲皮素的含量為39.47mg。 利用M

3、TT法檢測(cè)銀杏葉黃酮和槲皮素對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用，結(jié)果表明銀杏葉黃酮對(duì)人肝癌細(xì)胞HepG2的生長(zhǎng)具有抑制作用，槲皮素對(duì)HepG2和人胃癌細(xì)胞BGC823的增殖均有明顯的抑制作用，而且呈劑量時(shí)間依賴效應(yīng)。利用丫啶橙熒光染色檢測(cè)HepG2和BGC823細(xì)胞經(jīng)槲皮素處理后形態(tài)的變化，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞均出現(xiàn)明顯的凋亡小體，表明槲皮素可誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生凋亡。經(jīng)電泳檢測(cè)發(fā)現(xiàn)槲皮素處理過(guò)的腫瘤細(xì)胞DNA呈現(xiàn)DNAladder樣。此外利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)到槲皮素

4、將HepG2和BGC823細(xì)胞周期阻斷在G0/G1期。 體外銀杏葉黃酮和槲皮素都對(duì)正常小鼠靜息脾臟細(xì)胞的增殖無(wú)明顯影響，而與ConA或LPS共同作用時(shí)對(duì)脾臟細(xì)胞的增殖有抑制作用，且呈濃度依賴性。荷S-180昆明小鼠實(shí)體瘤實(shí)驗(yàn)表明，腹腔注射劑量為100mg/kg體重的槲皮素對(duì)S180實(shí)體瘤的抑瘤率為23.39％，脾臟指數(shù)和胸腺指數(shù)與正常小鼠對(duì)照均變小。這些結(jié)果表明槲皮素對(duì)實(shí)體瘤的抑制可能是通過(guò)直接的細(xì)胞毒作用，而不是通過(guò)免疫系統(tǒng)。