耐輻射球菌中RecA的調(diào)控蛋白研究.pdf

1、　　本文參照一般細(xì)菌RecA的調(diào)節(jié)模式，發(fā)現(xiàn)了耐輻射球菌編碼三個(gè)RecA調(diào)節(jié)蛋白類似物，包括兩個(gè)LexA和一個(gè)RecX，通過(guò)對(duì)它們的功能分析，研究RecA的調(diào)控機(jī)制，研究成果如下：首先，構(gòu)建了基因dra0074的突變菌株，通過(guò)免疫雜交和啟動(dòng)子活性分析，對(duì)比了野生型和突變體中RecA的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)表明，LexA(dra0074)同樣不參與recA基因的誘導(dǎo)表達(dá)，論證了耐輻射球菌RecA的表達(dá)不需要LexA蛋白。其次，構(gòu)建了基因dr131

2、0的突變菌株和過(guò)表達(dá)菌株，細(xì)胞水平分析表明耐輻射球菌RecX對(duì)RecA的活性具有抑制作用；通過(guò)對(duì)耐輻射球菌中重要的抗氧化酶CAT和SOD活性的分析，發(fā)現(xiàn)RecX蛋白不影響CAT和SOD蛋白的活性，而是直接抑制它們的表達(dá)。最后，通過(guò)比較野生型和突變體的電泳圖譜以及隨后的蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定，在鑒定出的36種蛋白中，發(fā)現(xiàn)RecX可以抑制包括RecA、SSB、PprA、SOD等DNA損傷誘導(dǎo)蛋白在內(nèi)的12種蛋白的表達(dá)，同時(shí)可以提高其他23種蛋白的