補腎益精法對衰老大鼠羰基毒化的干預作用.pdf

1、目的
　　 D-半乳糖頭頸部皮下注射建立亞急性衰老大鼠模型,各組分別給予生理鹽水、維生素E、二精靈復方及正常飲食,檢測大鼠學習記憶能力、血液粘度、腦肝腎組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、蛋白羰基水平、4-羥基壬烯醛(4-HNE)蛋白表達水平,探討補腎益精法對衰老模型大鼠羰基毒化的干預作用,以期明確腎精虧虛與衰老的關系以及補腎益精法在延緩衰老中的作用機理,為提高老年人生活質量開拓新思路,為補腎益精法延緩衰老

2、在臨床上的應用提供可靠的實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 將44只SPF級wistar雄性大鼠,體重200±20g,隨機分為4組,正常組、模型組、維生素E組、二精靈復方組。模型組、維生素E組、二精靈復方組分別采用頭頸部皮下注射D-半乳糖造模,造模同時正常組、模型組給予生理鹽水灌胃,維生素E組給予維生素E灌胃,二精靈復方組給予二精靈復方水煎液灌胃。造模及給藥6周后,進行水迷宮實驗檢測大鼠學習記憶能力,隨后取大鼠血液檢測血液粘

3、度,取大鼠腦、肝、腎組織檢測SOD活性、MDA含量、蛋白羰基水平、4-HNE蛋白表達水平及HE染色法觀察海馬組織CA1區(qū)形態(tài)結構。
　　 結果：
　　 1.Morris水迷宮檢測
　　 定位航向實驗中,各組大鼠逃避潛伏期均呈逐漸縮短趨勢。與正常組相比,模型組大鼠逃避潛伏期明顯延長(P＜0.05,P＜0.01)?？臻g探索實驗中,與正常組相比,模型組大鼠在目標象限停留時間明顯縮短(P＜0.01),穿越平臺次數(shù)明顯減少

4、(P＜0.01),20％外環(huán)區(qū)域百分比明顯增加(P＜0.01)。與模型組相比,二精靈復方組目標象限停留時間明顯延長(P＜0.01),穿越平臺次數(shù)明顯增加(P＜0.05),20%外環(huán)區(qū)域百分比明顯減少(P＜0.05)。
　　 2.血粘度檢測
　　 與正常組相比,模型組低切(全血1、全血5)、中切(全血50、全血100)、高切(全血200)全血粘度明顯增高(P＜0.05)、血漿粘度顯著增高(P＜0.01)、紅細胞壓積明顯升高

5、(P＜0.05)。與模型組相比,二精靈復方組全血粘度、血漿粘度、紅細胞壓積均明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。與維生素E組相比,二精靈復方組全血粘度和紅細胞壓積均有較好治療效果,但無顯著性差異。
　　 3.腦、肝、腎SOD活性、MDA含量、蛋白羰基含量
　　 與正常組相比,模型組大鼠SOD活性明顯降低(P＜0.01)、MDA含量明顯增高(P＜0.05,P＜0.01)、蛋白羰基水平明顯升高(P＜0.01)。與模型組相

6、比二精靈復方組SOD活性明顯升高、MDA含量明顯降低、蛋白羰基水平明顯降低(P＜0.05,P＜0.01)。與維生素E組相比,二精靈復方組有較好治療效果,但無顯著性差異。
　　 4.免疫組織化學染色法檢測4-HNE加成蛋白表達結果
　　 與正常組相比,模型組大鼠IOD值明顯升高(P＜0.01);與模型組相比二精靈復方組IOD值明顯降低(P＜0.01)。
　　 5.海馬組織CA1區(qū)組織形態(tài)觀察
　　 正常組椎

7、體細胞層染色清晰,細胞排裂整齊致密,胞核淺染,分布均勻。模型組海馬組織CA1區(qū)椎體細胞層排列紊亂,核深染、固縮、斷裂。二精靈復方組、維生素E組,細胞形態(tài)明顯改善。
　　 結論：
　　 實驗結果顯示,造模后,模型組大鼠逃避潛伏期、20%外環(huán)區(qū)域百分比明顯多于正常組大鼠,目標象限停留時間、穿越平臺次數(shù)明顯低于正常組大鼠,證明我們實驗造模成功,為后繼實驗提供了可靠的衰老模型。同時實驗結果還表明,補腎益精法可以顯著提高衰老模型大