IGF-1對動脈粥樣硬化斑塊易損性的實驗性研究.pdf

1、目的：1通過高脂飼料喂養(yǎng)和球囊擴張術建立兔動脈粥樣硬化模型，了解此模型所形成斑塊的大體形態(tài)，以及顯微鏡下斑塊的病理組成。2 探討胰島素樣生長因子-1（IGF-1）對實驗性動脈粥樣斑塊易損性的影響。方法：1動物造模：實驗動物（24只雄性新西蘭兔）購進后給予常規(guī)普通飼料喂養(yǎng)1周，以使其適應飼養(yǎng)環(huán)境，后實驗組及正常對照組分別給予高脂飼料及普通飼料喂養(yǎng)，1周后正常組行假手術，實驗組行動脈內(nèi)膜球囊擴張術配合高脂飲食建立動脈粥樣硬化模型。2 實驗分

2、組及給藥：將動物隨機分為正常對照組、模型組、IGF-1因子干預組、辛伐他汀干預組，術后正常對照組繼續(xù)給予普通飼料喂養(yǎng)，其余三組繼續(xù)給予動物高脂飼料喂養(yǎng)，共10周，同時IGF-1干預組每天給予0.1mg/mL的IGF-1因子 1mL 腹腔注射、辛伐他汀干預組給予辛伐他汀懸濁液按2.5mg/kg 給予灌胃（辛伐他汀片碾碎制成1mg/mL的懸濁液），模型組給予等量的生理鹽水灌胃。3 血脂測定：12周后處死動物，測血脂，采血前禁食水約12h。測

3、定血清總膽固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白水平。4 用病理學染色和免疫組化染色，測量相關病理學指標及巨噬細胞、IGF-1的陽性面積。5 用TUNEL 法測定凋亡細胞的陽性面積。6 檢測結果用x ? s表示，各組間差異比較用單因素方差分析。用SPSS16.0分析軟件進行統(tǒng)計分析結果。結果：1血脂情況：實驗12周末，模型組與正常對照組比較血脂各項指標水平差異均有統(tǒng)計學意義（p<0.05）；辛伐他汀組血脂TC、TG、HDL、LDL水

4、平與模型組型組相比均明顯降低（p<0.05），IGF-1與模型組比較中四項指標中TG、HDL差異有統(tǒng)計學意義（p<0.05）。2 病理學形態(tài)觀察：正常對照組主動脈內(nèi)膜光滑、三層結構清晰、內(nèi)皮細胞排列整齊，未見脂紋及斑塊形成。模型組主動脈管壁病變最重，管壁三層結構可見，但不清晰，內(nèi)膜明顯增厚，不光滑，內(nèi)皮細胞損傷脫落呈連續(xù)性缺失，可見斑塊突出管腔，斑塊表面覆蓋的纖維帽較薄，斑塊內(nèi)含有大量的巨噬/泡沫細胞，膽固醇結晶、平滑肌細胞等人類粥樣斑

5、塊主要成分，部分標本可見彈力膜斷裂和斑塊破裂，表現(xiàn)為易損斑塊的特點。3 病理形態(tài)及免疫組化定量分析：①與模型組相比各藥物干預組，斑塊頂部纖維帽厚度、斑塊肩部、頂部帽/核比值均有顯著增加（P<0.05 或P<0.01）；②肩部纖維帽厚度比較：IGF-1組較模型組增加（p<0.05），模型組與辛伐他汀組間以及IGF-1與辛伐他汀組間差異無統(tǒng)計意義（p>0.05）。③與模型組相比，各藥物干預組斑塊脂核面積/斑塊面積、斑塊直徑與對應管腔直徑比較

6、均顯著降低（p<0.05 或p<0.01），IGF-1組與辛伐他汀組比較二者差異無統(tǒng)計學意義（p>0.05）。④與模型組比較正常對照組、IGF-1組及辛伐他汀組中IGF-1陽性表達面積、顯色強度及染色指數(shù)明顯降低（P<0.05）。⑤高脂模型組斑塊內(nèi)巨噬細胞含量（RAM-11陽性面積）顯著增加；與高脂模型組相比，各藥物干預組斑塊內(nèi)巨噬細胞陽性細胞數(shù)量分級均顯著為低(p<0.01)，個藥物干預組間無明顯差異（p>0.05）。4 凋亡細胞檢測