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文檔簡介
1、目的:探討骨髓增生異常綜合征(MDS)患者骨髓異常克隆細胞的起源,即MDS患者骨髓CD34+CD38-造血干細胞和CD34+CD38+祖細胞中是否存在惡性克隆細胞及惡性克隆所占的比例;并研究CD34+CD38-造血干細胞和CD34+CD38+祖細胞長期培養(yǎng)形成集落的情況。
方法:1、用免疫磁珠分選技術(MACS)分選11例染色體異常的MDS患者(其中單一8號染色體三體4例,含有8號染色體三體的復雜核型2例,單一5q-2例,
2、含有5q-的復雜核型2例,5q-合并8號染色體三體1例)的骨髓單個核細胞(BMNC)中的CD34+CD38-細胞和CD34+CD38+細胞,分別制成涂片;將上述11例患者的骨髓液溶血得到骨髓有核細胞并甩片備FISH。然后在上述涂片上通過熒光原位雜交(FISH)方法比較CD34+CD38-、CD34+CD38+和骨髓有核細胞這三群細胞中異??寺〖毎陌俜直?。2、對其中2例8三體患者的CD34+CD38-造血干細胞和CD34+CD38+祖細
3、胞分別長期培養(yǎng)(LTC)6周后,接種到甲基纖維素完全培養(yǎng)基中進行分化培養(yǎng),14天后觀察是否有細胞集落形成。如果有集落形成則分析集落的克隆來源。
結果:1、這兩群細胞在5q-和8號染色體三體的MDS患者中均有惡性克隆的累及,但是CD34+CD38-干細胞中惡性克隆細胞的比例(46.3±8.1)%低于CD34+CD38+祖細胞中的惡性克隆細胞比例(75.9±6.8)%,p<0.001;惡性克隆比例在CD34+CD38+祖細胞與
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