TLR4-MyD88在AngⅡ誘導心肌肥厚中的作用研究.pdf

1、目的：
　　檢測TLR4、MyD88在AngⅡ誘導的心肌肥大細胞中的表達情況，同時觀察心肌細胞的炎癥因子（IL-1β、TNF-α）以及心肌肥厚標志物ANP、BNP、β-MHC mRNA的表達。TLR4抑制劑TAK242能否抑制AngⅡ誘導的心肌肥厚及減輕炎癥反應，探討AngⅡ誘導的心肌肥厚的分子機制，指導心肌肥厚及心力衰竭的治療。
　　方法：
　　1.實驗分組：
　　SPF級別C57BL/6品系周齡8-10周雄性

2、小鼠（體重20-25g），共21只，將其隨機分為3組，每組7只：血管緊張素(AngⅡ)埋泵組，血管緊張素(AngⅡ)埋泵+抑制劑TAK242組，生理鹽水埋泵組。
　　2.AngⅡ誘導小鼠心肌肥厚及TLR4抑制劑TAK242干預：
　　AngⅡ(1.3mg/kg/day)埋泵建立心肌肥厚模型、AngⅡ埋泵組每周腹腔注射抑制劑TAK2422次、及生理鹽水埋泵組作為對照。共飼養(yǎng)4周。
　　3.心臟小鼠取材：
　　4周后

3、解剖獲取小鼠心臟并稱重(HW)、稱量小鼠體重(BW)、測量左側脛骨長度(TL)，液氮速凍，存于-80°冰箱。
　　4.提取心肌細胞總RNA行RT-qPCR：
　　檢測心肌肥厚指標ANP、BNP、β-MHC，同時檢測TLR4、Myd88以及炎癥因子IL-1β、TNF-α的mRNA表達情況。
　　結果：
　　1.HW/BW與HW/TL的比較
　　AngⅡ埋泵組與生理鹽水埋泵組比較，心臟重量(HW)/小鼠體重(B

4、W)及心臟體重(HW)/脛骨長度(TL)顯著增大，P＜0.01，用TAK242干預AngⅡ埋泵組后，心臟重量(HW)/小鼠體重(BW)及心臟體重(HW)/脛骨長度(TL)比值明顯變小，P＜0.01。
　　2.心肌肥厚標志物的表達。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，心肌肥厚標志物ANP、BNP、β-MHC顯著增大，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，有顯著差異，P＜0.01
　　3.炎癥因子I

5、L-1β、TNF-αmRNA的檢測。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，炎癥因子表達增加，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，表達減少，有顯著差異，P＜0.01。
　　4.TLR4、MyD88mRNA的檢測。
　　AngⅡ埋泵組比生理鹽水埋泵組比較，TLR4、MyD88mRNA表達明顯增強，P＜0.01，與AngⅡ埋泵+抑制劑TAK242組比較，有顯著差異，P＜0.01。
　　統(tǒng)計學：<