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文檔簡介
1、目的:我們前期研究發(fā)現給小鼠腹腔注射三氮脒溶液可以通過激活眼內血管緊張素轉化酶2的活性減輕葡萄膜炎。本實驗研究局部應用三氮脒滴眼液的抑炎效果并探討NF-κB和p38 MAPK是否參與其抑炎效果的調控。
方法:將6-8周SD大鼠54只隨機分成6組,即:空白對照組、模型組、0.025%三氮脒給藥組、0.05%三氮脒給藥組、0.1%三氮脒給藥組、0.1%地塞米松組給藥組。每兩個小時滴眼一次,每次10μl,每天滴眼6次連續(xù)兩天。第一天
2、最后一次給藥后在大鼠皮下注射200μg的內毒素誘導葡萄膜炎。注射內毒素24小時后行裂隙燈照相和臨床評分。抽取房水,分離虹膜睫狀體復合物。BCA蛋白定量試劑盒定量房水蛋白。用ELISA試劑盒檢測房水中TNF-α,IL-6蛋白濃度。Real-time PCR檢測虹膜睫狀體復合物中炎癥因子IL-1β,TNF-α,iNOS,COX-2以及NF-κB p65的表達。Western Blot檢測虹膜睫狀體復合物中NF-κB p65和磷酸化的p38
3、MAPK蛋白量。用CD11b對空白對照組、模型組、0.1%三氮脒給藥組、0.1%地塞米松給藥組中虹膜睫狀體中炎癥細胞進行染色。
結果:0.05%,0.1%三氮脒組和地塞米松組均能明顯降低葡萄膜炎臨床評分與房水蛋白濃度。0.1%三氮脒可以減少房水中TNF-α,IL-6炎癥蛋白的表達,同時抑制虹膜睫狀體復合物中炎癥因子 IL-1β, TNF-α,iNOS,COX-2以及NF-κB p65(p<0.01)的mRNA表達,以及NF-κ
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