青霉素單克隆抗體的制備及其酶聯(lián)免疫試劑盒的初探.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究制備了一株針對青霉素G的單抗,研究結(jié)果如下: 用人工抗原BP-BSA免疫BALB/c小鼠,經(jīng)三次免疫后,分離血清,建立間接競爭ELISA方法并測定血清效價。結(jié)果表明:包被抗原(BP-OVA)最適濃度為1μg/ml,血清效價為1:8000,抗體最適濃度為3.6ng/ml。 BALB/e小鼠經(jīng)BP-BSA第四次免疫5天后,取脾細胞與SP2/0骨髓瘤細胞按照10:1的比例進行細胞融合,選擇PEG2000作為融合劑。接種在

2、96孔板上,融合率為98%(195/199)。經(jīng)過4次亞克隆,得到1株能穩(wěn)定分泌BP單克隆抗體的雜交瘤細胞株,命名為OF1。運用體內(nèi)誘生法制備單抗,收集腹水并進行單抗特性的鑒定。經(jīng)過ELISA檢測、染色體技術(shù)和SDS-PAGE電泳,表明OF1單抗的亞型為IgG<,1>,輕鏈為κ型,染色體數(shù)為90~105條,分子量為167.3KD,腹水效價為1:8.1×10<'5>,親和常數(shù)為3.718×10<'7>L/mol。與其結(jié)構(gòu)相似的同系物幾乎無

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