丹參注射液對宮內感染致早產仔鼠腦室周圍白質軟化癥中NGF及 GDNF表達的影響.pdf

1、　　目的：通過觀察丹參注射液對宮內感染致早產仔鼠腦室周圍白質軟化組織中神經生長因子(NGF)和膠質細胞源性神經營養(yǎng)因子(GDNF)水平的調節(jié)作用,探討活血化瘀藥物丹參注射液改善早產腦室周圍白質軟化的作用機制,為臨床治療提供理論依據。
　　方法：( 1 )動物模型制備：24 只脂多糖(LPS)組孕鼠孕第 16 天予LPS350μg/kg·d,6只生理鹽水組孕鼠予同劑量的生理鹽水,連續(xù) 2天腹腔注射。孕 22 天前出生的仔鼠為早產鼠

2、。仔鼠出生后隨機選取 LPS 組和對照組各 2 只孕鼠取子宮和胎盤行HE染色,判斷宮內感染情況。LPS組和對照組仔鼠各10只斷頭取腦組織行HE染色,觀察腦白質損傷情況。(2)分組：隨機選LPS組早產仔鼠40只,LPS組仔鼠隨機分為4組,每組10只,分別為：丹參注射液高劑量組(A)、丹參注射液低劑量組(B)、神經節(jié)苷酯組(C)、模型組(D)；隨機選取生理鹽水組足月產仔鼠10只作為空白對照組(E)。(3)干預方法：生后第2周A組予丹參注射液

3、 9ml/㎏·d 腹腔注射,B 組予丹參注射液 4.5ml/㎏·d 腹腔注射,C組予單唾液酸四己糖神經節(jié)苷脂鈉注射液 6ml/㎏·d腹腔注射,D組與E組予生理鹽水9ml/㎏·d腹腔注射,干預1周。(4)21日齡時對5組大鼠行神經行為學檢測(懸吊試驗、斜坡試驗、Cylinder 試驗),免疫組化方法對腦組織 NGF、GDNF進行檢測。
　　結果：(1)30 只雌性大鼠,LPS 組 24 只孕鼠,6 只分娩前死亡,13 只提前分娩,

4、5只足月分娩,共娩出早產仔鼠79只,死產仔鼠46只,足月仔鼠49只。生理鹽水組孕鼠6只,均順利足月生產,共娩出活產足月仔鼠 57只。與生理鹽水組仔鼠相比,LPS 組仔鼠出生后皮膚顏色紫紺、活動少、體重低。(2)LPS 組孕鼠子宮壁及胎盤病理 HE 染色可見血管充血、水腫,可見大量中性粒細胞浸潤。LPS 組仔鼠腦室周圍白質出現(xiàn)染色淡、結構疏松、神經纖維排列紊亂、可見出血改變等病理變化。(3)神經行為學檢測：①與對照組相比,模型組及各干預治

5、療組神經行為學檢測均有顯著差異(P﹤0.01)；②與模型組相比,丹參注射液低劑量組、高劑量組及神經節(jié)苷酯組神經行為學檢測均有統(tǒng)計學意義；③與丹參注射液低劑量組相比,丹參注射液高劑量、神經節(jié)苷酯組3組相互間無統(tǒng)計學差異(P﹥0.05),說明丹參注射液低劑量、高劑量和神經節(jié)苷酯在改善仔鼠的神經行為學方面效果相當或者與樣本量較少有關。(4) NGF與GDNF的表達：模型組及丹參注射液低劑量組、高劑量組、神經節(jié)苷酯組陽性表達增強,對照組表達較少

6、(P ﹤0.01)；丹參注射液低劑量組、高劑量組、神經節(jié)苷酯組陽性表達均較模型組明顯增強(P﹤0.01)；丹參注射液低劑量組、高劑量組及神經節(jié)苷酯組 3 組相比,相互間差異無統(tǒng)計學意義(P﹥0.05)。
　　結論：(1)宮內感染可導致早產仔鼠神經行為學改變、使腦組織中 NGF 和GDNF表達上調。(2)丹參注射液對宮內感染致早產仔鼠腦組織中 NGF和GDNF表達有調節(jié)作用,其減輕腦損傷機制可能與上調腦組織中 NGF 及 GDNF