下調(diào)REV3L基因表達逆轉(zhuǎn)結(jié)腸癌細胞耐藥性的實驗研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：探討靶向下調(diào)跨損傷DNA合成途徑(Translesion DNA Synthesis，TLS)中關(guān)鍵基因REV3L對人結(jié)腸癌細胞耐藥性的逆轉(zhuǎn)作用。
　　方法：利用RNA干擾技術(shù)靶向下調(diào)REV3L基因在人高分化耐奧沙利鉑結(jié)腸癌細胞系（THC8307/L-OHP）中的表達，以實時熒光定量PCR（qRT-PCR）和免疫細胞化學分別從mRNA及蛋白水平檢測REV3L基因下調(diào)情況。以基因低表達具有統(tǒng)計學顯著性的細胞為實驗組。運用甲基噻

2、唑藍四氮唑鹽法（MTT）、流式細胞術(shù)、細胞形態(tài)學等方法，檢測實驗組和兩個對照組腫瘤細胞耐藥增敏、耐藥性相對逆轉(zhuǎn)的情況以及細胞凋亡等指標。
　　結(jié)果：轉(zhuǎn)染質(zhì)粒mU6pro-siREV3的耐藥性結(jié)腸癌細胞其REV3L基因表達被成功抑制，檢測相關(guān)指標結(jié)果顯示：①實驗組細胞對奧沙利鉑的敏感性增強，耐藥系數(shù)明顯低于空白對照組和陰性對照組；②實驗組細胞基因調(diào)控后，耐藥性的相對逆轉(zhuǎn)率顯著高于陰性對照組；③實驗組細胞的細胞凋亡率顯著高于兩個對照組

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