Ucn3及CRF受體在大鼠低氧厭食中的作用.pdf

1、高原低氧可引起人們多種生理反應，如頭昏、心悸、氣短以及食欲下降等，特別是低氧引起的厭食反應更加重了其對機體正常代謝的干擾和正常生理功能的傷害。促腎上腺皮質激素釋放激素家族(CRFfamily)的重要生理功能是整合各種應激信號并做出相應的應答反應，維持內環(huán)境的穩(wěn)定，調節(jié)下丘腦-垂體-腎上腺皮質軸(HPA軸)功能、神經內分泌功能和自主神經系統(tǒng)功能。研究表明CRF家族的成員參與了攝食行為和能量平衡調節(jié)。為了研究高原環(huán)境對機體應激系統(tǒng)的影響，我

2、們采用低壓艙模擬低氧應激的方法，研究低氧對大鼠攝食行為的影響及下丘腦VMH(ventromedialhypothalamicnucleus)區(qū)Ucn3和CRFR2在低氧影響攝食行為中的作用，并對NPY參與的低氧下攝食的適應機制作了初步探索。 我們實驗室的研究已經證明了低氧應激可激活HPA軸，表現為下丘腦PVN區(qū)CRFmRNA表達水平增高以及下丘腦CRF分泌增加，血漿ACTH和皮質酮升高，而下丘腦AVPmRNA下降，但低氧對Ucn

3、3和CRFR2基因表達的影響以及Ucn3和CRFR2是否介導了低氧引起的攝食抑制反應尚未見報道。本文首先模擬了5km連續(xù)低氧(10.8％O2)應激，測試了5km連續(xù)低氧對大鼠攝食行為和體重的影響；使用RT-PCR檢測了低氧應激下大鼠下丘腦VMH區(qū)Ucn3和CRFR2mRNA表達的變化。為了研究CRF家族成員在低氧應激影響攝食行為中的作用，我們通過注射CRFR1拮抗劑CP-154,526和CRFR2拮抗劑ASvg-30研究了CRFR1和C

4、RFR2參與的攝食行為調節(jié)。為了探討低氧下攝食行為的適應機制，我們通過免疫組織化學和RT-PCR研究了弓狀核區(qū)NPY蛋白和mRNA的表達。 結果：(1)5km連續(xù)低氧對大鼠攝食和體重的影響5km連續(xù)低氧降低低氧暴露期間大鼠的體重和攝食，其中以應激開始后第1天的攝食和體重下降最為明顯。5km低氧對攝食的抑制在低氧第10天恢復至對照水平，而對體重的抑制作用一直持續(xù)到實驗結束(低氧10天)。 (2)5km連續(xù)低氧對大鼠下丘腦V

5、MH區(qū)Ucn3mRNA和CRFR2mRNA表達的 影響與對照組相比，5km低氧暴露引起VMH區(qū)Ucn3mRNA顯著上升，而VMH區(qū)CRFR2mRNA顯著下降。 (3)低氧下注射CP-154,526和ASvg-30對攝食和體重的影響5km連續(xù)低氧顯著降低低氧期間大鼠體重和攝食。與低氧組相比，低氧+腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)組動物第1天和第2天的攝食沒有變化，第3、4、5天的攝食顯著降低。

6、 5km急性低氧4h顯著抑制大鼠的攝食。與低氧組相比，低氧+腦室注射ASvg-30組動物攝食顯著降低，并呈現劑量依賴性。 兩種處理對大鼠體重均無影響。(4)低氧下注射CP-154,526和ASvg-30對血漿皮質酮的影響5km低氧持續(xù)5天，低氧組大鼠的血漿皮質酮水平仍顯著高于對照組。腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)部分逆轉了5km低氧引起的血漿皮質酮升高。 急性5km低氧顯著降低12h的

7、禁食引起的血漿皮質酮升高，腦室注射ASvg-30部分逆轉了急性5km低氧對血漿皮質酮的降低作用。 (5)5km連續(xù)低氧下注射CP-154,526對下丘腦VMH區(qū)Ucn3和CRFR2mRNA表達的影響與對照組相比，5km連續(xù)低氧引起VMH區(qū)Ucn3mRNA水平顯著升高，CRFR2mRNA水平顯著降低。腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)逆轉了5km低氧引起的Ucn3mRNA水平升高，而對H區(qū)CRFR2mRN

8、A水平無影響。 (6)2km和5km連續(xù)低氧對ARC區(qū)NPY蛋白含量和mRNA表達水平的影響與對照組相比，2km連續(xù)低氧(16.0％O2)下，大鼠ARC區(qū)NPY蛋白含量呈現雙相變化，表現為低氧第1、2天低氧組大鼠ARC區(qū)NPY蛋白顯著下降，之后ARC區(qū)NPY蛋白逐漸升高，低氧15天后，顯著高于對照組。 與對照組相比，5km連續(xù)低氧引起大鼠ARC區(qū)NPY蛋白迅速升高。低氧第1天，低氧組大鼠ARC區(qū)NPY蛋白顯著高于對照組，

9、之后逐漸恢復至對照水平。 (7)5km連續(xù)低氧下CP-154,526對ARC區(qū)NPY蛋白含量和mRNA表達水平的影響與對照組相比，5km連續(xù)低氧降低低氧第5天ARC區(qū)NPYmRNA表達水平，在蛋白水平無顯著差異。同低氧組相比，腹腔注射CP-154,526(30mg/kg，連續(xù)注射5天)逆轉了低氧對NPYmRNA表達的抑制，在蛋白水平無顯著差異。 結論：(1)5km連續(xù)低氧顯著降低大鼠在低氧暴露期間的攝食和體重。