CTGF、HGF及Cx43在PCOS大鼠卵巢中的表達(dá)及二甲雙胍的干預(yù)作用.pdf

1、目的：
　　以來(lái)曲唑誘導(dǎo)的多囊卵巢綜合征[1]（Polycysticovarysyndrome,PCOS）大鼠模型為研究對(duì)象，探討結(jié)締組織生長(zhǎng)因子(CTGF)、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子（HGF）、間隙連接蛋白43（Cx43）在多囊卵巢綜合癥（PCOS）大鼠卵巢中的表達(dá)，并探討應(yīng)用胰島素增敏劑-二甲雙胍后，PCOS大鼠卵巢這三種因子的變化，探討其用于干預(yù)PCOS的作用機(jī)理。
　　方法：
　　選取大鼠55只（6周齡清潔級(jí)雌性Wist

2、ar），依據(jù)體重及窩別隨機(jī)分為對(duì)照組15只、模型組40只。應(yīng)用來(lái)曲唑造模，大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天后，每日行陰道涂片(巴氏染色)監(jiān)測(cè)大鼠的動(dòng)情周期的變化。喂養(yǎng)21天后，從模型組40只中隨機(jī)選取10只用于造模效果評(píng)價(jià)，當(dāng)成功率大于80％時(shí)，將模型組剩余的30只大鼠，隨機(jī)分為二甲雙胍干預(yù)組15只和PCOS組15只，分別喂服二甲雙胍300mg/(kg·d)和等量生理鹽水。14天后各組大鼠進(jìn)行口服葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)（OGTT），血糖儀測(cè)定空腹血糖（FPG

3、）、服糖后1h血糖（1hPG）、服糖后2h血糖（2hPG），采用放射免疫法測(cè)定各組大鼠血清黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睪酮(T)、雌二醇(E2)值及空腹胰島素（FIN）值。然后將大鼠稱重并解剖，打開(kāi)腹腔摘取卵巢，進(jìn)行固定、包埋，并組織切片后將標(biāo)本HE染色光鏡下觀察卵巢組織的病理結(jié)構(gòu)變化，最后采用免疫組化法測(cè)定卵巢組織中CTGF、HGF、CX43的表達(dá)水平，并采用圖像分析儀獲取三種因子表達(dá)的灰度值進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　

4、結(jié)果：
　　1．動(dòng)情周期的變化：應(yīng)用來(lái)曲唑12天后大鼠動(dòng)情周期發(fā)生變化，表明無(wú)排卵[2]；而對(duì)照組動(dòng)情周期依然存在規(guī)律性。
　　2．卵巢解剖學(xué)變化：與對(duì)照組相比，PCOS組大鼠卵巢重量升高(P<0.05)。對(duì)照組卵巢顏色較紅，體積較?。荒Ｐ徒M大鼠卵巢顏色蒼白，體積較大，包膜下隱約可見(jiàn)擴(kuò)張的卵泡。與PCOS組相比，干預(yù)組卵巢重量顯著降低(P<0.05)，卵巢體積較PCOS組明顯縮小。
　　3．卵巢組織學(xué)變化：對(duì)照組鏡下可

5、見(jiàn)多個(gè)不同發(fā)育程度的卵泡，顆粒細(xì)胞呈6-8層，形態(tài)完整，卵泡膜細(xì)胞排列整齊。PCOS組鏡下可見(jiàn)卵泡呈擴(kuò)張狀態(tài)，卵泡內(nèi)卵母細(xì)胞或放射冠消失，顆粒細(xì)胞層數(shù)減少，且排列松散，卵泡膜細(xì)胞層相對(duì)明顯增厚，干預(yù)組鏡下見(jiàn)顆粒細(xì)胞層數(shù)有所增加，卵泡膜細(xì)胞層明顯變薄。
　　4．OGTT及FIN水平：PCOS組血清FIN水平、FPG、1hPG、2hPG顯著高于對(duì)照組(P<0.05)；干預(yù)組血清FIN水平、FPG、2hPG顯著低于PCOS組(P<0.0

6、5).
　　5．血清性激素水平：PCOS組血清LH、T濃度顯著高于對(duì)照組(P<0.05)，血清FSH、E2濃度顯著低于對(duì)照組(P<0.05)；干預(yù)組血清LH、T濃度顯著低于PCOS組(P<0.05)，血清FSH、E2濃度顯著高于PCOS組(P<0.05)。
　　6.卵巢局部調(diào)節(jié)因子的表達(dá)：PCOS組卵巢顆粒細(xì)胞及卵泡膜細(xì)胞CTGF、HGF表達(dá)較對(duì)照組升高，Cx43的表達(dá)降低(P<0.05)，而在干預(yù)組CTGF、HGF的表達(dá)比