新型周圍神經支架材料的制備及其在周圍神經損傷修復中的應用.pdf

1、周圍神經缺損后的再生和功能恢復一直是臨床中常見的難題，也是神經科學領域研究的熱門問題。目前最常用最有效的方法仍是自體神經移植術。但自體神經移植有其不足之處，因此，諸多學者推出了一些其他的修復法。如受損神經自身延長端端縫合、神經端側縫合、神經側側縫合、神經斷端肌肉內埋入、骨骼肌橋架移植、自體非神經組織移植、同種異體神經移植等，上述方法由于各自的局限性發(fā)展?jié)摿Σ淮?，單靠提高外科技術，很難再提高周圍神經外科的療效。 近年來，由于材料學

2、和醫(yī)學的結合日趨緊密，使得組織工程的進展飛速。對于神經修復的研究重點轉向為對神經再生的研究，著眼于使用人工神經替代物來促進周圍神經再生，以達到神經快速生長、功能完全恢復的理想目標。周圍神經不同于其它組織，外來的移植物并不行使缺損組織已經失去或降低的功能，只是通過SCs細胞、神經膜和神經營養(yǎng)因子等起到暫時的支架作用，促進神經再生、支持和引導再生軸突到達遠端靶器官。通常模擬神經結構來構建人工神經支架：天然或人工合成的導管模擬神經外膜或神經束

3、膜，導管內充填條索狀、細管狀(模擬神經內膜管)或海綿狀物質，作為引導雪旺氏細胞遷移和神經軸突生長的通道。 研究表明，用細胞外基質制成的海綿狀結構的周圍神經支架材料不僅具有良好的生物相容性及可降解性，同時也有利于神經纖維的遷延和生長。由于Ⅰ型膠原吸收快，故本實驗中選用殼聚糖為神經支架外殼。殼聚糖是天然高分子聚合物的優(yōu)勢在于無免疫原性，無毒性，無刺激性，無熱原反應，無致突變乃致死性突變效應，并具有來源廣泛、價格便宜等優(yōu)點，已廣泛應用

4、于生物領域，而且在神經誘導修復手術后，可以不必再行二次手術將其取出，是理想的細胞支架材料。 本論文構建了一種新型周圍神經支架并用以修復兔周圍神經缺損，建立了一種構建周圍神經的方法，希望能為周圍神經缺損的修復提供一種可行的選擇。實驗分為以下兩個部分： 1、周圍神經支架的構建.目的：以殼聚糖復合Ⅰ型膠原蛋白利用自制的周圍神經模具通過冷凍干燥技術制備一種周圍神經支架材料。方法：從SD大鼠鼠尾中提取高純度的Ⅰ型膠原蛋白，將其與殼

5、聚糖分別溶于0.2M醋酸溶液中，利用自制的周圍神經模具制備成管狀支架，冷凍干燥，以紫外線照射的方法使其交聯。經掃描電鏡觀察、比較其與周圍神經的異同、測量微孔直徑、計算孔隙率。測試0.01mol/L磷酸鹽緩沖液(PBS)中30d體外降解率。并埋入SD大鼠皮下看其與周圍組織反應。結果：制備出的支架材料具有半透性外殼及高孔隙率的內部海綿狀結構，其微孔直徑為15-55μm，孔隙率為95％，體外降解率為19％，與周圍組織無毒性反應。結論：以殼聚糖

6、復合Ⅰ型膠原蛋白結合冷凍干燥技術，制備出具有半透性外殼及高孔隙率內部海綿狀結構的神經支架材料，生物相容性良好具應用潛力。 2、周圍神經缺損的修復：目的：以形態(tài)學方法觀測殼聚糖復合膠原蛋白支架材料橋接兔坐骨神經15mm缺損的療效。方法：以殼聚糖復合膠原蛋白經冷凍干燥技術制備新型周圍神經支架材料，并用此材料橋接修復兔坐骨神經缺損15mm,術后24W分別以辣根過氧化物酶(HRP)逆行示蹤，HE、甲苯胺藍染色法，掃描電鏡及電生理等方法觀