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1、目的:觀察丹參素對(duì)血小板衍生生長(zhǎng)因子-BB(platelet derivedgrowth factor-BB PDGF-BB)刺激大鼠肝星狀細(xì)胞(hepatic stellate cellHSC)增殖、Ⅰ型膠原合成、磷酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(Phosphorylated extracellular signal-regulated kinase 1/2,P-ERK 1/2)表達(dá)的影響,探討丹參素抗肝纖維化的分子機(jī)制。 方法
2、:1.采用改良的膠原酶.鏈霉蛋白酶消化法分離大鼠HSC,α-SMA免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定分離的HSC;2.MTT比色法檢測(cè)丹參素對(duì)PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖活性影響;3.免疫細(xì)胞化學(xué)染色法測(cè)定丹參素對(duì)PDGF-BB刺激的大鼠HSC Ⅰ型膠原合成的影響;4.Western blot測(cè)定丹參素對(duì)PDGF-BB刺激的大鼠肝星狀細(xì)胞P-ERK1/2表達(dá)影響。 結(jié)果:1.原代分離的HSC得率為3.5×107/鼠左右,存活率大于98%
3、,傳一代的HSC純度大于99%; 2.與空白對(duì)照組比較PDGF-BB刺激組HSC增殖明顯增強(qiáng)(P<0.01),丹參素可抑制PDGF.BB刺激大鼠HSC增殖(P<0.05),隨丹參素作用濃度的增加抑制作用增強(qiáng)(P<0.01); 3.PDGF-BB刺激組HSC I型膠原合成增強(qiáng)(P<0.01),丹參素可抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的大鼠HSC I型膠原合成(尺<0.05),隨丹參素作用濃度的增加抑制作用增強(qiáng)(P<0.01);
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