大黃對急性膽汁淤積大鼠腸道黏膜屏障的影響及機制的探討.pdf

1、目的：通過α-異硫氰酸萘酯（ANIT）誘導急性膽汁淤積大鼠模型，觀察大黃對淤膽型大鼠腸道粘膜的作用，并探討大黃對腸道粘膜屏障的影響機制。
　　 方法：將70只幼年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠隨機分為對照組（10只）、中毒組（30只）、干預組（30只）。干預組及中毒組大鼠按50mg/kg一次性灌服α-異硫氰酸萘酯（ANIT）誘導急性肝內膽汁淤積病變，干預組大鼠于ANIT灌服前3天，開始每天予大黃液灌胃（每次4ml/

2、kg，2次/天）直至實驗結束。分別于灌服ANIT后24h、48h、72h三個時間點處死實驗動物，取腹主動脈血檢測血清總膽紅素（TB）和丙氨酸轉氨酶（ALT）的濃度；取末端回腸組織通過光鏡和電鏡觀察腸粘膜的病理改變；用免疫組化技術(SABC法)及Western Blot測定腸粘膜中閉鎖蛋白（Occludin），緊密連接蛋白ZO-1（zonula occludens-1），腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及核轉錄因子-κB（NF-κB）的分布

3、和表達。采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計學分析。
　　 結果：
　　 1.與正常對照組相比，各時間點中毒組與干預組血清ALT、TB均顯著升高（P<0.05），其中24h明顯升高，48h達高峰，72h逐漸下降；同時間點干預組血清ALT、TB較模型組顯著降低（P<0.05）。
　　 2.光鏡和電鏡觀察腸粘膜的病理改變：正常對照組腸粘膜絨毛形態(tài)結構完整，中毒組腸粘膜絨毛稀疏、結構破壞；干預組腸粘膜病理改變較模型組明顯減

4、輕。
　　 3.Western Blot結果與免疫組織化學結果相一致，與正常對照組相比，各時間點中毒組和干預組ZO-1，Occludin明顯降低（P<0.05），其中24 h明顯下降，48 h達到最低，72 h逐漸恢復；與正常對照組相比，中毒組和干預組TNF-α，NF-κB明顯增加（P<0.05），其中24 h顯著增高，48 h達到高峰，72 h逐漸恢復；同時間點干預組與中毒組比較，ZO-1、Occludin表達顯著增加（P<0