AQP1、AQP3在人不同退變級別椎間盤髓核細胞中表達的相關研究.pdf

1、目的：
　　 椎間盤退變(Intervertebral disc degeneration，IVDD)是引起腰腿痛的一個重要原因，但目前為止，椎間盤退變的生理、病理機制仍未明確。髓核組織的退變是椎間盤退變的中心環(huán)節(jié)，本研究擬通過免疫組化方法和Real time-PCR技術對正常組和退變組的髓核組織中水通道蛋白1(Aquaporin1，AQPl)和水通道蛋白3(Aquaporin3，AQP3)表達水平的比較研究，探討水通道蛋白1和

2、水通道蛋白3在椎間盤髓核組織中的作用，了解水通道蛋白在椎間盤髓核的生理及病理意義，探討一種新的椎間盤退變的病理生理機制，進而為椎間盤退變的防治提供一種新的思路和方向。
　　 方法：
　　 根據(jù)Pfirrmann分級方法將椎間盤髓核組織標本分為5個等級，1-5級分別對應A、B、C、D、E五個組別。將標本進行固定、洗滌、脫水、透明、浸蠟、包埋、切片，然后運用HE染色技術觀察髓核組織退變的病理表現(xiàn)。隨后運用免疫組織化學和Rea

3、l time-PCR技術觀察AQP1及AQP3在椎間盤髓核的表達水平，分別測量其免疫組化陽性細胞平均光密度(MOD)和mRNA表達含量。對得出的數(shù)據(jù)運用17.0統(tǒng)計軟件進行單因素方差分析。
　　 結果：
　　 1.HE染色觀察：正常組：髓核組織結構疏松，基質成分完整，髓核細胞多，膠原纖維走行清楚，細胞核結構完整。退變組：髓核組織皺縮，基質成分減少，膠原纖維增生粗大，走行紊亂，髓核細胞少，細胞核結構不完整。
　　

4、2.免疫組化分析：退變組AQP1及AQP3的陽性細胞表達較正常組明顯減弱，其MOD值隨椎間盤退變程度加重呈進行性下降。對各組間的MOD值行單因素方差分析，AQP1：A組與C、D、E組比較，B組與D、E組比較，C組與E組比較，D組與E組比較，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；其余各組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。AQP3的MOD值在各個組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。對AQP1、AQP3的MOD值和Pfirrm

5、ann分級、年齡之間進行Pearson積矩線性相關分析：AQP1與Pfirrmann分級之間呈顯著反相關(r=-0.862，P＜0.01);AQP3與Pfirrmann分級之間呈顯著反相關(r=-0.944，P＜0.01); AQP1與年齡之間呈顯著反相關(r=-0.794，P＜0.01)，AQP3與年齡之間呈顯著反相關(r=0.881，P＜0.01)。
　　 3.Real time-PCR分析：退變組髓核組織的Ⅱ型膠原mRNA

6、表達較正常組明顯減少，AQP1及AQP3的mRNA表達隨椎間盤退變程度加重呈進行性下降。對各組間AQP1及AQP3的mRNA表達行單因素方差分析，AQP1：A組與C、D、E組比較，B組與D、E組，C組與E組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；其余各組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。AQP3：A組與D、E組比較，B組與D、E組，C組與E組比較差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；其余各組組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。