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文檔簡介
1、目的: 內膜癌為雌激素依賴性疾病,高雌激素環(huán)境是是導致疾病發(fā)生與加重的主要因素之一,而絕經(jīng)后女性隨著絕經(jīng)年限的增加,雌孕激素水平是否與內膜癌的發(fā)生相關,相關報道較少,目前尚無具有臨床指導的報道。本文將利用酶聯(lián)免疫分析法檢測絕經(jīng)后子宮內膜癌患者血清雌孕激素水平及其與雌孕激素受體表達的關系。 實驗材料與方法: 于2007年4月至2008年6月在中國醫(yī)科大學附屬盛京醫(yī)院婦產(chǎn)科住院絕經(jīng)后手術患者70例,其中對照組:經(jīng)病理
2、確診子宮內膜癌患者40例,其中絕經(jīng)時間≤10年患者20例,絕經(jīng)時間>10年患者20例;實驗組:因子宮脫垂行子宮切除患者30例,其中絕經(jīng)時間≤10年患者10例,絕經(jīng)時間>10年患者20例。實驗組患者平均年齡:60.33±6.47歲;對照組患者平均年齡:65.57±8.39歲;兩組比較,P>0.05,具有可比性。入組患者均經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準,并在每次采集標本前均由患者簽署知情同意書??崭钩槿§o脈血2ml,700轉/分離心,留取血清,2-8
3、℃保存待用。兩組入選患者術前三個月內均未使用性激素類藥物。術后均經(jīng)病理證實排除其他雌激素依賴性疾病存在。 一、酶聯(lián)免疫分析利用酶聯(lián)免疫分析法檢測雌孕激素水平,用美國貝克曼DX:800免疫分析儀,采用化學發(fā)光法進行檢測。分別應用雌孕激素標準品和指控品制定標準曲線和室內質控,質控通過后即可檢測標本。應對每一個標本設置一個樣品架的位置,輸入樣品信息和需檢測試名稱后,按下run鍵開始檢測,系統(tǒng)自動計算檢測結果。雌孕激素水平檢測結果以pg
4、/ml表示,每組結果以x±spg/ml進行比較。 二、免疫組織化學法H&E染色:實驗組癌組織石蠟切片常規(guī)脫蠟至水,蘇木素染色5分鐘,流水沖洗5分鐘,1%鹽酸酒精分化,自來水返藍30分鐘,依紅染色4分鐘,蒸餾水洗5次,梯度乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片。 采用免疫組化鏈霉素抗生物素蛋白-過氧化物酶連接(S-P)法,以已知子宮內膜組織陽性切片作為陽性對照,以0.01M磷酸鹽緩沖溶液(PBS)代替一抗作為陰性對照。按說明書
5、操作。顯微鏡下觀察。結果判定:ER,PR以細胞核呈黃褐色為陽性表達。隨機取5個高倍視野,ER,PR無著色或陽性細胞<25%為陰性;陽性細胞數(shù)≥25%為陽性。 實驗結果: 實驗組與對照組比較,雌孕激素水平無明顯差異,雌激素水平:(t=0.844,P=0.779>0.05);孕激素水平:(t=0.044,P=0.563>0.05)。而絕經(jīng)年限≤10年組,雌激素水平:(t=0.509,P=0.010<0.05);孕激素水平:(
6、t=0.799,P=0.160>0.05)及>10年組雌激素水平:(t=1.655,P=0.002<0.05);孕激素水平:(t=0,871,P=0.534>0.05)。 子宮內膜癌患者雌孕激素水平與雌孕激素受體表達關系:實驗組患者術后病理免疫組化檢查雌孕激素受體(ER/PR)表達,陽性與陰性組雌孕激素水平無統(tǒng)計學差異. 結論: 子宮內膜腺癌為雌激素依賴性疾病,絕經(jīng)后內膜腺癌患者血清雌孕激素水平無異常增高,但不同
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