大鼠腦體感皮質局灶性缺血后可塑性的初步研究.pdf

1、一、光化學誘導大鼠局灶性腦缺血模型的建立
　　缺血性腦血管病是目前人類的主要死亡原因之一,具有高發(fā)病率,高致殘率和高死亡率的特點.建立良好的腦缺血動物模型對研究急性腦梗死后的病理生理變化和篩選治療藥物具有重要意義。光化學法誘導血栓生成與人類血栓性腦梗死的發(fā)病過程較為相似,其照射所需光源波長與內源光學信號成像(optical intrinsic signal imaging,OISI)技術相同.OISI技術是目前少數(shù)能實時觀察腦缺血

2、病理過程的技術之一。
　　本研究的目的是通過OISI技術觀測光化學誘導大鼠局灶性腦缺血模型梗塞區(qū)的血栓形成過程。目的建立一個穩(wěn)定的大鼠局灶性腦缺血模型,并通過OISI技術觀測血栓形成過程,判斷梗塞的形成,為實時研究腦缺血時的病理生理變化提供新的方法。
　　方法：利用光化學誘導血栓形成的原理,使大鼠局部皮質完全梗塞,同時應用OISI技術觀測血栓形成過程,通過TTC染色和EB染色觀察梗塞灶大小和血腦屏障的破壞情況。
　　結

3、果：光化學誘導過程中觀察到血栓形成,通過信號分析確定光化學誘導皮層梗塞所需時間為30min.該方法造模100％成功,大鼠無死亡(存活率為100%),腦梗塞后未見明顯肢體運動障礙。腦組織切片TTC染色證實梗塞灶在體感皮質區(qū),大小基本恒定,EB染色顯示血腦屏障破壞。結論光化學誘導大鼠腦梗塞模型穩(wěn)定性好,死亡率低,是研究腦缺血的理想模型。OISI技術是動態(tài)觀察活體腦梗死過程中腦血流、血管和功能變化的有效方法。
　　二、康復訓練對大鼠局灶

4、性腦梗死區(qū)周邊皮質GFAP、GAP-43表達的影響
　　康復訓練能促進腦梗死的行為學恢復,改善運動功能,但其具體機制尚不清楚。目前認為腦卒中后的功能康復與腦的可塑性有關。膠質纖維酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)是星形膠質細胞特異表達的中間絲蛋白,其表達值增加被認為是膠質細胞反應性或功能活性增強的典型表現(xiàn)之一。生長相關蛋白-43(growth-associatedprotein-4

5、3,GAP-43)主要存在于神經元的軸突中,是參與細胞形態(tài)和連接的調節(jié)蛋白,可以作為成熟中樞神經系統(tǒng)中突觸重建和可塑性的標記物。
　　本文擬觀察局灶性體感皮質缺血后,康復訓練對GFAP與GAP-43表達的影響,研究缺血后腦功能恢復的可塑性機制。目的研究康復訓練對大鼠局灶性腦梗死區(qū)周邊皮質GFAP、GAP-43表達的影響,為康復訓練治療腦缺血疾病提供理論依據(jù)。
　　方法：成年健康雄性SD大鼠隨機分為腦缺血模型組,康復訓練組和假

6、手術對照組。采用光化學方法建立局灶性腦梗死模型,造模后置于普通籠中飼養(yǎng);康復訓練組在模型組的基礎上進行電動跑臺訓練,每天30 min;假手術對照組僅給予麻醉及頭皮切開、縫合,不進行光照射激活形成血栓。每組大鼠于術后7 d,14 d,21 d處死,應用免疫組織化學方法觀察各組大鼠不同時期梗死灶周圍皮質GFAP和GAP-43的表達。
　　結果：7 d康復訓練組和模型組大鼠梗死灶周圍皮質GFAP陽性星形膠質細胞發(fā)生肥大和增生性改變,顯著

7、高于對照組;康復訓練組和模型組之間GFAP表達無明顯差異?？祻陀柧毥M梗死灶周圍皮質GFAP的表達在14 d和21 d顯著高于模型組和對照組。模型組梗死灶周圍皮質GFAP的表達在14 d和21 d顯著高于假手術對照組?？祻陀柧毥M大鼠GAP-43表達在7 d為最高,14 d后開始下降,但均顯著高于模型組和假手術對照組。模型組大鼠GAP-43表達在7 d和14d高于假手術對照組。21 d時三組大鼠GAP-43表達無明顯差異。結論康復訓練能促進