結(jié)締組織生長因子和來氟米特對腎臟細(xì)胞增殖及膠原合成的影響.pdf

1、腎臟纖維化是絕大多數(shù)慢性腎臟疾病的終末期過程，其主要病理特征是腎間質(zhì)細(xì)胞增生和細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)異常積聚。目前關(guān)于腎臟纖維化的確切發(fā)病機制仍然不完全清除，同時也沒有發(fā)現(xiàn)預(yù)防和治療腎臟纖維化確切有效的措施。近年來的研究表明，多種細(xì)胞因子參與了腎臟纖維化過程，在這些細(xì)胞因子當(dāng)中，結(jié)締組織生長因子(CTGF)的作越來越得到重視，本課題觀察了重組人結(jié)締組織生長因子(rhCTGF)對于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的

2、影響，從而研究CTGF與腎臟纖維化的關(guān)系。 來氟米特(LEF)是近年來發(fā)現(xiàn)具有抗組織纖維化的藥物之一，該藥物最初是用在治療類風(fēng)濕疾病中的一種免疫抑制劑，近些年又用于治療一些腎臟疾病，并且取得了不錯的療效，同時發(fā)現(xiàn)對肝臟、皮膚等組織具有抗纖維化形成的作用，那么是否它在防治腎臟纖維化中同樣有著很好的效果呢?本課題觀察了來氟米特活性代謝產(chǎn)物A771726對于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖及膠原合成的影響，同時在研究CT

3、GF對腎臟細(xì)胞促纖維化過程的基礎(chǔ)上，進一步觀察A771726對上述過程的干預(yù)作用。 第一部分CTGF和LEF對人腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)成纖維細(xì)胞增殖的作用目的研究結(jié)締組織生長因子和來氟米特對體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖的影響。 方法用MTT法觀察不同濃度rhCTGF(0.1-100ng/ml)和A771726(0.5-500ug/ml)分別作用于體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞后細(xì)胞增殖受到的

4、影響；在此基礎(chǔ)上，觀察兩種藥物聯(lián)合對細(xì)胞增殖的影響。 結(jié)果在rhCTGF作用組中腎小管上皮細(xì)胞的增殖無明顯變化(P＞0.05)，成纖維細(xì)胞的增殖增加(P＜0.01)；在A771726作用組中，腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖均受到抑制(P＜0.01)，兩種干預(yù)因素共同作用時，兩種細(xì)胞的增殖均受到不同程度的抑制(P＜0.01)。 結(jié)論CTGF能夠誘導(dǎo)腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞的增殖但對小管細(xì)胞的增殖無明顯影響；LEF能夠抑制兩種

5、細(xì)胞的增殖，同時對CTGF誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖也有抑制作用。 第二部分CTGF和LEF對腎小管上皮細(xì)胞及間質(zhì)成纖維細(xì)胞膠原合成的影響目的研究結(jié)締組織生長因子和來氟米特對體外培養(yǎng)的人腎小管上皮細(xì)胞和間質(zhì)成纖維細(xì)胞膠原合成的影響。 方法在第一部分實驗基礎(chǔ)上，用不同濃度rhCTGF和A771726分別作用及聯(lián)合作用于培養(yǎng)的腎臟細(xì)胞，獲得作用后的細(xì)胞外液，應(yīng)用ELISA法測定其中Ⅰ型、Ⅳ型膠原的含量的變化。 結(jié)果rhCTGF干