apelin基因rs2235306位點多態(tài)性與哮喘的相關性研究.pdf

1、研究背景:
　　支氣管哮喘（簡稱哮喘，Asthma）是一種氣道慢性炎癥性疾病，其有多種細胞和細胞因子共同參與，既受遺傳因素又受環(huán)境因素的影響，具有明顯家族聚集傾向性，屬于多基因遺傳性疾病，是由多因素共同影響和作用的結果，哮喘具有異質性，患者之間存在明顯個體差異。哮喘的發(fā)病機制十分復雜，至今尚未明確定論。近幾年來研究表明，炎癥機制、免疫調控及遺傳因素在哮喘的發(fā)生過程中起著重要的作用。而apelin作為一種機體脂肪組織合成并且分泌的一

2、些前炎癥細胞因子可能在炎癥應答和免疫途徑發(fā)揮著重要的作用。1998年，通過反向藥理學方法apelin首次從牛胃的分泌物中提取出來并進一步純化，apelin是血管緊張素受體AT1相關受體蛋白(putative receptor protein related to the angiotensin receptor AT1,APJ)的天然配體，后來研究發(fā)現apelin具有多種生物學功能。apelin原前體肽的特異性結合apelin受體的區(qū)域

3、是C末端，各物種間完全保守的氨基酸共有23個，包括從Trp55到Phe77，且富含精氨酸，這提示C末端可能具有重要的特異性功能。apelin影響著多種呼吸系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展，有研究表明apelin表達水平最高的是在肺組織中，在調節(jié)肺部血液循環(huán)的微環(huán)境、及調節(jié)免疫、氧化損傷、內皮增殖中發(fā)揮著作用，而且還具有抗病毒及抗炎等作用。目前為止，但apelin基因與哮喘發(fā)病的關系研究甚少，而其在分子生物學水平的研究迄今為止未見報道。本研究通過病例

4、對照，并應用四引物擴增受阻突變體系（Tetra-primer ARMS）聚合酶鏈反應（polymerase Chain Reaction,PCR），簡稱T-ARMS-PCR，來研究apelin基因rs2235306多態(tài)性與哮喘的關系以及對哮喘病情嚴重程度的影響。本研究是我們課題組的一個后續(xù)研究，目的在于探討apelin基因多態(tài)性與哮喘及哮喘嚴重程度的關系，以論證apelin是哮喘的重要發(fā)病機制假說，為哮喘病人的預防和有效治療提供理論根據

5、，進而從早期就可以對哮喘進行干預，以達到減少哮喘發(fā)作并指導相應的基因治療的目的。
　　目的:
　　探討apelin基因rs2235306位點多態(tài)性與哮喘的相關性。
　　方法:
　　以外周血全血DNA為模板，應用四引物擴增受阻突變體系T-ARMS-PCR方法對158例哮喘患者（AS）和79例健康個體（NC）apelin基因rs2235306位點基因型進行分析，同時進行肺功能檢查(FEV1、FVC、FEV1/FVC)

6、。
　　結果:
　　AS組和NC組apelin基因rs2235306位點等位基因T和C頻率分布具有統(tǒng)計學意義(χ2=6.906，P=0.009，OR=1.688，95％CI=1.140-2.497)，哮喘組（AS組）C等位基因頻率顯著高于健康對照組（NC組）；AS組和NC組基因型的分布具有統(tǒng)計學意義(χ2=14.243，P=0.000，OR=3.894，95%CI=1.861-8.149)，其中CC基因型患哮喘的風險較高，為

7、TT+TC基因型的3.894倍。AS輕度組和AS中重度組基因型中，apelin基因rs2235306位點基因型CC和基因型TT+TC頻率及等位基因T和C頻率比較均無統(tǒng)計學意義。
　　結論:
　　（1）apelin基因rs2235306位點多態(tài)性和哮喘的發(fā)病具有一定的相關性；
　?。?）apelin基因rs2235306位點C等位基因可能是哮喘的遺傳易感基因，CC基因型攜帶者哮喘的患病風險可能增加；
　?。?）ap

8、elin基因rs2235306位點多態(tài)性與哮喘的嚴重程度無明顯相關性。
　　意義:
　　本課題具有創(chuàng)新性。本課題是國內外首次尋找apelin基因多態(tài)性在哮喘病人中的分布特點，以確定apelin基因rs2235306位點SNPs與哮喘嚴重程度的關系，驗證apelin是哮喘的重要發(fā)病機制假說。在實驗技術上具有新穎性，采用應用T-ARMS-PCR技術觀察其SNPs與哮喘病嚴重程度關系，只需要一步PCR反應及瓊脂糖電泳技術，就能尋找