自制三種鎳鉻烤瓷合金的生物相容性評價——體外細胞毒性實驗研究.pdf

1、目的：本實驗用自制三種鎳鉻烤瓷合金浸提液培養(yǎng)小鼠L929成纖維細胞，通過MTT法檢測細胞增殖活力并計算相對增值率，從而對這三種合金的生物相容性進行初步檢測，并與口腔科常用的鎳鉻合金，純鈦的生物相容性進行比較和評價，以便為該材料的臨床應用提供生物學依據。結合國內外關于鎳鉻烤瓷合金的研究成果，研制開發(fā)的這種適合于臨床應用的同類產品，進一步改善了其結構和性能，為其在國內口腔領域中的廣泛應用奠定了生物學基礎。 方法: 一.實驗材

2、料 將實驗試樣分為：A組：1號鋼，B組：2號鋼，C組：3號鋼，D組：純鈦(Ti)，E組：鎳鉻合金(Ni-Cr)，F組：鉛。將A-F組材料分別制成直徑為15mm，高為4mm的扁圓柱體。消毒滅菌后，放入96孔培養(yǎng)板中，用RPMI1640培養(yǎng)液配制材料浸提液。選用傳代的對數生長期的L-929細胞，用RPMI1640液配制成密度為1.0×105個/ml的細胞懸液備用。 二.實驗方法 取96孔培養(yǎng)板，每孔加入細胞懸液100

3、μl。在1-6組孔中分別加入A-F組的材料浸提液100μl，在第7組孔內加入RPMI1640培養(yǎng)液100μl后，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。分別于培養(yǎng)后的1-5天各取一塊培養(yǎng)板，在倒置相差顯微鏡下觀察活細胞的形態(tài)。在每孔中加入5mg/ml的MTT液20μl，繼續(xù)培養(yǎng)4小時后取出。吸出培養(yǎng)液，在每孔中加入DMS0150μl，用自動酶標儀檢測吸光度值。將各組的吸光度值作單因素方差分析和均數間兩兩比較的統(tǒng)計學分析。計算各組的細胞相對增值率(RGR)并作

4、細胞毒性級評定。 結果: 一．細胞的形態(tài)學觀察 培養(yǎng)24小時，陽性對照組中貼壁生長的細胞呈梭形或多角形，懸浮的細胞呈圓形或不規(guī)則形，胞質內出現空泡及顆粒狀物質。其余各組的細胞幾乎全部貼壁生長，形態(tài)正常，胞質均勻。培養(yǎng)120小時，陽性對照組中的細胞大部分脫落，胞質，胞核濃縮，甚至可見許多質膜崩解，核膜破裂的死亡細胞。其余各組細胞大部分繼續(xù)貼壁生長，細胞密度增加，可見散在的懸浮的退化細胞及個別的死亡細胞。 二

5、．統(tǒng)計學處理結果 金屬材料組及陰性對照組與陽性對照組之間的吸光度值的差異均有統(tǒng)計學意義。五種金屬材料組的細胞相對增殖率由大到小的順序依次為：純鈦，1號鋼，2號鋼，3號鋼，鎳鉻合金。1，2，3號鋼對細胞均有極輕微的毒性，鎳鉻合金對細胞表現出1級細胞毒性，但統(tǒng)計學分析結果顯示：五種金屬材料組與陰性對照組的吸光度值之間的差異均無統(tǒng)計學意義。 結論: 本實驗證實了1號鋼，2號鋼和3號鋼均具有極微弱的細胞毒性，但符合材料對