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文檔簡介
1、目的:通過檢測腦組織內(nèi)CD68、神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白(GFAP)水平的變化及評估神經(jīng)行為學(xué)研究重組促紅細(xì)胞生成素(rhEPO)對宮內(nèi)感染導(dǎo)致腦白質(zhì)損傷早產(chǎn)鼠的神經(jīng)保護(hù)作用。
方法:選取20只孕15天的Wistar大鼠,按3∶1比例隨機(jī)分為感染組(n=15)和對照組(n=5),兩組分別于孕15天腹腔注射脂多糖(LPS0.3mg/Kg)及等量的無菌生理鹽水,于孕21天行剖宮產(chǎn)術(shù)取出胎鼠。兩組分別隨機(jī)取胎盤(n=10)和新生鼠腦組
2、織(n=10)予蘇木素-伊紅染色觀察病理變化。同時(shí)隨機(jī)選取對照組中新生鼠40只為早產(chǎn)對照組;選取感染組中新生鼠80只,隨機(jī)分為EPO治療組(n=40)和感染對照組(n=40)。EPO治療組于生后即刻腹腔注射rhEPO(5000IU/Kg),早產(chǎn)對照組及感染對照組同時(shí)腹腔注射等量生理鹽水。三組新生大鼠均分別于生后1天、3天、7天各取10只仔鼠行甲醛灌注取腦,利用免疫熒光染色檢測腦組織中CD68和GFAP的水平;三組均于生后30天,各取10
3、只仔鼠利用曠場試驗(yàn)、懸吊試驗(yàn)、斜坡試驗(yàn)、拒俘反應(yīng)試驗(yàn)進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)觀察。
結(jié)果:1.感染組孕鼠的胎盤血管充血、水腫,并可見大量中性粒細(xì)胞浸潤。感染組中新生鼠的腦白質(zhì)染色淡、結(jié)構(gòu)疏松;神經(jīng)纖維粗細(xì)不均,走向紊亂,可見核小、體積小、深染及少突起的欠分化神經(jīng)元;膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)量增多,可見細(xì)胞核固縮、胞漿疏松、細(xì)胞皺縮等凋亡改變。
2.三組新生1日齡大鼠腦組織未見明顯CD68、GFAP陽性染色;感染對照組及EPO治療組兩組3日齡
4、、7日齡大鼠腦組織中CD68、GFAP水平較早產(chǎn)對照組均顯著上升,各組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05); EPO治療組3日齡、7日齡大鼠腦組織的CD68、6FAP水平較感染對照組均顯著下降,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。EPO治療組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平顯著下降,感染對照組7日齡大鼠腦組織的CD68、GFAP較3日齡的水平有所上升,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
3.神經(jīng)行為測試
5、:感染對照組30日齡的大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分顯著低于早產(chǎn)對照組;EPO治療組的大鼠神經(jīng)行為學(xué)評分明顯高于感染對照組,差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:1.孕鼠腹腔注射LPS可以成功建立早產(chǎn)腦白質(zhì)損傷大鼠模型。
2.新生早產(chǎn)大鼠早期應(yīng)用rhEPO能夠減輕宮內(nèi)感染早產(chǎn)大鼠腦白質(zhì)損傷的炎癥反應(yīng)及星形膠質(zhì)細(xì)胞反應(yīng)性增生,對宮內(nèi)感染后的早產(chǎn)大鼠腦白質(zhì)損傷有一定的治療作用。
3.早期應(yīng)用rhEPO可以改善宮內(nèi)感
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