霉酚酸酯對糖尿病大鼠腎小管-間質損傷的保護作用及機制.pdf

1、背景與目的：糖尿病腎病(diabetic nephropathy，DN)在我國已成為終末期腎病(end-stage renal disease，ESRD)的重要病因，既往的研究大多都集中于DN腎小球尤其系膜細胞的研究，然而正如其他一些腎小球疾病一樣，相對于糖尿病腎小球病變而言其。腎小管一間質病變對DN的遠期預后具有更重要的意義。腎小管間質損傷早期表現(xiàn)為腎小管上皮細胞肥大，基底膜增厚和細胞外基質(extracellularmatrixc，

2、ECM)增多，如未得到有效控制既將逐漸進展至腎小管萎縮和間質纖維化，最終呈現(xiàn)不可逆性進展進入慢性腎衰竭。晚近研究表明炎癥在糖尿病腎小管一間質損傷的發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮了重要的作用，多種細胞因子、炎癥細胞參與了DN腎小管一間質損傷的進展。這些關于炎癥機制的研究為一些抗炎免疫藥物用于阻斷糖尿病腎小管一間質損傷的進展提供了理論依據。霉酚酸酯(mycophenolatemofetil，MMF)作為免疫抑制劑以往多被用于移植術后的抗排斥反應，現(xiàn)臨床已被

3、用于多種腎小球腎炎。而在一些非免疫因素致病的腎病中的應用也有新的發(fā)現(xiàn)。本文探討MMF對DN腎小管一間質損傷的保護作用及其可能機制。 方法：應用鏈脲佐菌素(streptozotocin，STZ)誘導大鼠糖尿病模型，糖尿病模型的成立由大鼠尾動脈抽血檢測血糖(BG)由全自動生化分析儀檢測，隨機分三組：對照組、模型組與MMF給藥組。MMF采取10mg.kg-1.d-1灌胃給藥，8wk后觀察尿白蛋白排泄率(AER)，腎小管-間質病理形態(tài)學

4、變化，過碘酸希夫染色(PAS)染色對腎組織作病理形態(tài)學觀察所測腎小管.間質面積按以下標準評分： 0：正常； 1:間質炎癥與纖維化、腎小管萎縮與擴張伴管型形成<25％所測區(qū)域； 2：損傷面積在25-50％所測區(qū)域；3：損傷面積>50％所測區(qū)域。腎小管-間質損傷指數(TII)為以上各積分中位數。應用免疫組化方法檢測腎小管一間質骨橋蛋白(osteopontin,OPN)與α-平滑肌肌動蛋白(alpha-smooth m

5、uscle actin，α-SMA)蛋白表達，Western印跡檢測腎組織轉化生長因子β1(transforming growth factor-β,TGFβ1)蛋白表達。 結果:1、各組大鼠一般指標變化模型組大鼠表現(xiàn)為血糖升高、體重下降、相對腎重(腎重/體重)增加，MMF給藥8wk沒有防止模型組大鼠血糖升高與體重下降。模型組大鼠相對腎重與AER明顯高于對照組(p<0.01)，MMF給藥大鼠相對腎重與AER明顯低于模型組(p<0.

6、05)2、各組大鼠腎小管.間質病理形態(tài)學變化模型組大鼠表現(xiàn)為腎小管萎縮、間質纖維化、炎癥細胞浸潤，統(tǒng)計學分析顯示tll明顯高于對照組(0.84+0.25比0.38±0.14，p<0.01)，提示本模型大鼠已出現(xiàn)腎小管.間質損害；MMF給藥組腎小管-間質損傷明顯減輕，TII明顯低于模型組(0.64±0.22比0.84+0.25，p<0.05)。3、各組大鼠腎小管.間質OPN與α-SMA免疫組化指標變化對照組腎小管.間質OPN幾乎無表達，α

7、-SMA僅表達于小管-間質血管平滑肌細胞以及極少量的表達于對照組腎小管上皮細胞和間質中。模型組腎小管-間質OPN與α-SMA與對照組相比表達明顯增多(p<0.01)，OPN主要表達于腎小管上皮細胞，α-SMA主要表達于腎小管上皮細胞以及小管間質中，腎小球周亦有α-SMA表達增多。MMF給藥組與模型組相比，OPN與α-SMA表達明顯減少(P<0.01)。4、各組大鼠腎組織TGFβ1表達變化Western印跡條帶光密度分析顯示模型組腎組織T