冠心病患者心房肌Cx40、Cx43的變化及在房顫中的作用研究.pdf

1、研究背景:房顫(AF)的觸發(fā)、驅動和維持機制目前仍不是很清楚，在觸發(fā)、驅動機制方面，有許多研究報道，發(fā)現(xiàn)心臟腔靜脈系統(tǒng)如冠狀靜脈、上下腔靜脈、肺靜脈系統(tǒng)等部位的灶性放電觸發(fā)陣發(fā)性房顫?；A研究表明：心臟腔靜脈系統(tǒng)存在心房肌細胞延伸的心肌肌袖，進一步研究表明肺靜脈肌袖在胚胎起源上有別于心房肌，而與起源靜脈竇的竇房結、房室結、希氏束等傳導系統(tǒng)存在共性。研究還發(fā)現(xiàn)，在肺靜脈心肌層中有與竇房結的結樣細胞非常相似的超微結構的細胞，從而提示肺靜脈內

2、的結樣細胞有潛在的起搏功能。因此，肺靜脈肌袖中具有潛在的起搏功能細胞及與心房組織在胚胎起源的不同使二者的電生理特性存在差異，從而在房顫的發(fā)生中具有重要作用。此外心房肌迷走神經(jīng)張力異常也可能和觸發(fā)機制有關，迷走神經(jīng)干、心臟脂肪墊和心臟內血管神經(jīng)叢可能使自律細胞膜電位減小、自律性增高，后除極與觸發(fā)活動誘發(fā)房性早搏、短陣房性心動過速和房顫。 本研究分為以下三部分： 第一部分冠心病患者心房肌Cx40mRNA、Cx40表達的變化及

3、在心房顫動發(fā)生中的作用 目的：觀察冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴大(SR+AD)及心房顫動并左房擴大者(AF+AD)左、右心房肌細胞縫隙連接蛋白(Cx40mRNA、Cx40)的表達變化、探討Cx40mRNA、Cx40在左、右心耳肌中的表達、與左心房大小的關系和在冠心病房顫發(fā)生中的作用。 方法：選擇26例接受冠狀動脈旁路移植術的冠心病患者為研究對象，26例患者術前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和

4、心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8例，SR組12例，分別于手術中切取左、右心耳標本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標本)。用RT-PCR方法及免疫印跡法檢測Cx40mRNA、Cx40的表達。 結果： 1.Cx40mRNA、Cx40表達量均值在三組患者的右心房肌標本中無顯著差異。 2.Cx40mRNA、Cx40表達量均值在SR+AD、AF+AD組左心耳肌標本中比較無顯著性差異。 3.C

5、x40mRNA、 Cx40表達量均值在SR+AD、AF+AD組左心耳肌標本中與三組患者的右心耳肌標本比較明顯降低，有顯著性差異。 結論： 1.左心房擴大后左心房肌Cx40mRNA、Cx40表達下調。 2.左心房擴大并房顫后Cx40mRNA、Cx40表達無進一步下調。 3.左心房擴大和左房Cx40表達下調可能是房顫的產(chǎn)生和維持的重要因素。 第二部分冠心病患者心房肌Cx43mRNA和Cx43表達的變化

6、及在房顫中的作用 目的：觀察冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴大(SR+AD)及心房顫動并左房擴大者(AF+AD)左、右心房肌細胞Cx43mRNA和Cx43表達的變化、探討冠心病患者Cx43mRNA和Cx43表達的變化及在房顫中的作用。 方法：選擇26例接受冠狀動脈旁路移植術的冠心病患者為研究對象，26例患者術前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8

7、例，SR組12例，分別于手術中切取左、右心耳標本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標本)。用RT-PCR法檢測Cx43mRNA表達，用免疫印跡法檢測Cx43蛋白的表達。 結果：Cx43mRNA和Cx43表達量均值在三組患者的左、右心房肌標本中采用方差分析及兩-兩比較均無顯著差異。 結論： 1.冠心病患者不論是否發(fā)生左房擴大和房顫，左右心房肌細胞中Cx43mRNA表達無明顯變化。 2.冠心病患者不論是否發(fā)生

8、左房擴大和房顫，左右心房肌細胞中Cx43表達無明顯變化，3.冠心病患者左房擴大和房顫對Cx43mRNA和Cx43的表達均無明顯影響，說明Cx43mRNA和Cx43表達的變化對冠心病房顫的發(fā)生影響較少。 第三部分Cx40在冠心病患者左右心房肌中的重構及在房顫中的作用 目的：應用免疫組化技術對Cx40進行定位、定性、定量，采用激光共聚焦顯微鏡觀察Cx40在冠心病患者竇性心律正常左房大小(SR)、竇性心律左房擴大(SR+AD)

9、及心房顫動并左房擴大者(AF+AD)左、右心房肌細胞側-側和端-端縫隙連接處的分布，與左心房大小的關系，探討Cx40在左右心房肌細胞中的分布變化及其在冠心病房顫發(fā)生中的作用。光鏡下觀察心房肌細胞及細胞間質的結構變化，Cx40在冠心病患者SR組、SR+AD組及AF+AD組左、右心房肌細胞側-側和端-端縫隙連接處的分布數(shù)，與左心房大小的關系，探討心房肌細胞、細胞間質及Cx40重構的變化及在冠心病房顫發(fā)生中的作用。 方法：選擇26例接

10、受冠狀動脈旁路移植術的冠心病患者為研究對象，26例患者術前均接受冠狀動脈造影檢查，根據(jù)心電圖和心臟彩超資料分為三組：AF+AD組6例，SR+AD組8例，SR組12例，分別于手術中切取左、右心耳標本(心房大小正常者一般只切取右心耳肌標本)。用激光共聚焦顯微鏡和光鏡觀察縫隙連接蛋白Cx40在左右心耳肌橫切面和縱切面上的分布及其在側-側連接處及端-端連接處的大小和密度變化； 結果： 1.Cx40在三組患者右心房肌端-端連接處及

11、側-側連接處的大小變化無顯著差異。 2.SR+AD、AF+AD組左心房肌Cx40在端-端連接處及側-側連接處的大小與SR左心房組和三組右心房肌比較明顯增加。 3.Cx40在端-端連接處及側-側連接處的大小變化均值在SR+AD、AF+AD組左心房肌中比較無顯著性差異。 4.左心房擴大后不論是否出現(xiàn)房顫，心房肌細胞、細胞間的基質及Cx40發(fā)生了重構?？p隙連接蛋白40呈明顯的異質性分布，縫隙連接處平均熒光斑面積增大，中