Ang-1及其受體Tie-2在哮喘大鼠氣道中的表達(dá).pdf

1、支氣管哮喘(以下簡(jiǎn)稱哮喘)的基本特征是由嗜酸性粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞等多種細(xì)胞及細(xì)胞組份引起的慢性氣道炎癥,同時(shí)氣道形態(tài)的變化反映了其結(jié)構(gòu)的變化,即氣道重塑(airway remodeling).現(xiàn)在已被人們共同認(rèn)可,它包括上皮細(xì)胞的脫落,基底膜的增厚,血管的擴(kuò)張和增殖,氣道平滑肌的增殖,黏液腺和杯狀細(xì)胞的增生、膠原的沉積.血管從原始的管腔變成各級(jí)由內(nèi)皮細(xì)胞和血管周細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞組成的網(wǎng)絡(luò)的過(guò)程中,促血管生成素-1(angiopo

2、ietin-1,Ang-1)及其受體 Tie-2起著非常重要的作用.Ang-1是肌肉分泌型配體,在生理性和病理性血管生成過(guò)程中都起著重要作用.據(jù)報(bào)道Ang-1能調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞黏附分子與細(xì)胞之間的連接,還能阻止由血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)或炎性介質(zhì)引起的血管滲漏從而發(fā)揮抗炎作用.也能夠通過(guò)內(nèi)皮特殊受體 Tie-2活化磷酸二酯酶,磷酯酰肌醇.3 激酶和酪氨酸激酶,顯著抑制

3、VEGF引起的嗜酸性粒細(xì)胞的趨化.因此,Ang-1可能對(duì)與炎癥所致的微血管滲漏有治療意義. 在Ang家族中,有四種形式,分別是Ang-1,Ang-2,Ang-3,Ang-4,Ang-1廣泛表達(dá)在成人多種組織中.目前大多研究集中在Ang-1和Ang-2.Tie是血管內(nèi)皮細(xì)胞上特異的酪氨酸激酶型受體,包括Tie-1、Tie-2兩種,由于尚未發(fā)現(xiàn)Tie-1受體的配體,所以目前大多數(shù)研究都集中在Tie-2受體.Tie-2主要表達(dá)在血管內(nèi)

4、皮細(xì)胞(endothelial cells,ECS)和早期造血細(xì)胞.目前國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)到研究Ang-1及其受體Tie-2在哮喘中的作用,國(guó)外也剛剛開始.本實(shí)驗(yàn)中通過(guò)激發(fā)復(fù)制哮喘模型,采用免疫組化(immnohistochemical)方法檢測(cè)Ang-1及其受體Tie-2在正常組、哮喘組及干預(yù)組不同組間氣道壁表達(dá)變化,采用計(jì)算機(jī)病理圖象分析系統(tǒng)分析各組大鼠氣道壁厚度與上述兩因子之間的關(guān)系,旨在探索.Ang-1及其受體tie-2在哮喘病理生理發(fā)

5、展過(guò)程中的作用,從而為哮喘氣道重塑的治療和預(yù)防提供新的思路.材料和方法將45只健康雌性SD大鼠(體重110±10g,5-6周齡),隨機(jī)分為以下各組:(1)對(duì)照組:腹腔注射1ml生理鹽水,并吸入生理鹽水.(2)模型組:制備哮喘模型,OVA(雞卵白蛋白)致敏,1﹪OVA激發(fā).第1d每只大鼠腹腔注射1ml10﹪OVA混懸液(內(nèi)含1ml生理鹽水,100mg氫氧化鋁,100mgOVA)致敏,第8 d、15d各重復(fù)一次,第16d始用OVA激發(fā),將大

6、鼠置于特制密閉玻璃容器中,用超聲霧化器噴入1﹪OVA,隔日一次,每次20min,激發(fā)20次.(3)地塞米松干預(yù)組:激發(fā)前30min,按2mg/kg腹腔注射地塞米松溶液,其他同模型組.各組大鼠分別于末次激發(fā)后24h內(nèi)用苯巴比妥鈉腹腔麻醉(100mg/只)處死.HE染色觀察氣道結(jié)構(gòu),免疫組化染色后,采用計(jì)算機(jī)病理圖象分析系統(tǒng)分析各組大鼠氣道壁表達(dá)Ang-1及其受體Tie-2陽(yáng)性百分?jǐn)?shù),在10×20下測(cè)氣道壁厚度,分析Ang-1及Tie-2與

7、氣道壁厚度兩者之間的關(guān)系,統(tǒng)計(jì)分析均采用SPSS(11.0)統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行計(jì)算,結(jié)果以算術(shù)平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(x+s)表示.各組資料經(jīng)方差齊性檢驗(yàn)后采用單因素方差分析法(one-way ANOVA),并進(jìn)行直線相關(guān)分析,以α=0.05為檢驗(yàn)水準(zhǔn),P<0.05為差異具有顯著性.結(jié)果1.各組所測(cè)得的氣道的厚度與對(duì)照組比較,模型組(47.266±2.531)和干預(yù)組(39.267±2.011)氣道壁厚度較對(duì)照組(36.533±2.166)顯著增加(

8、P<0.01),模型組(47.266±2.531)較干預(yù)組顯著增加(P<0.01).2.Ang-1及其受體Tie-2在大鼠氣道壁的表達(dá)在對(duì)照組及干預(yù)組,Ang-1及其受體Tie-2相對(duì)弱表達(dá)于氣道上皮細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等.而在模型組中,Ang-1及其受體Tie-2則強(qiáng)表達(dá)于氣道上皮細(xì)胞,平滑肌細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞等. Ang-1模型組(103.9487±8.2914)與對(duì)照組(76.0320±3.7728)及干預(yù)組(9

9、0.6180±5.2339)比較,表達(dá)均顯著增加(P<0.01),干預(yù)組與對(duì)照組比較也顯著增加(P<0.01). Tie-2模型組(99.2307±8.1913)與對(duì)照組(75.3153±3.7321)及干預(yù)組(86.6633±3.7321)比較,表達(dá)均顯著增加(P<0.01),干預(yù)組與對(duì)照組比較也顯著增加(P

10、氣道壁厚度呈明顯正相關(guān)(r<,Ang-1>=0.719,r<,Tie-2>=0.746,P<0.01),Ang-1與其受體Tie-2間也呈明顯正相關(guān)(r<,Ang1-Tie-2>=0.742,P<0.01). 結(jié)論 1.Ang-1及其受體Tie-2在氣道中廣泛表達(dá). 2.哮喘模型大鼠氣道壁中Ang-1及其受體Tie-2表達(dá)明顯上調(diào),且與氣道壁厚度密切相關(guān). 3.Ang-1及其受體Tie-2可能抑制哮喘氣道