重度子癇前期與假性血友病因子相關性的臨床標本檢測和體外實驗研究.pdf

1、【目的】
　　通過體外實驗和臨床標本檢測,研究重度子癇前期假性血友病因子(Von Willebrand Factor,VWF)轉錄、合成、分泌水平變化特點。
　　【方法】
　　1.無菌采集并枸櫞酸鈉抗凝孕產(chǎn)婦分娩前、分娩后第3天外周血和臍血;剖宮產(chǎn)術中無菌采集臍帶和胎盤組織;
　　2.臍靜脈內皮細胞(HUVEC,human umbilical vein endothelial cell)原代及傳代培養(yǎng);
　

2、　3.熒光定量PCR法檢測臍帶和胎盤組織中內皮細胞表達VWF水平以及Cocl2(100umol/L)對傳代培養(yǎng)的臍靜脈內皮細胞VWF表達的影響;
　　4.免疫組織化學方法檢測臍帶和胎盤組織中內皮細胞VWF的合成以及Cocl2(100umol/L)對傳代培養(yǎng)的臍靜脈內皮細胞VWF表達的影響;
　　5.ELISA檢測孕產(chǎn)婦分娩前、分娩后第3天外周血和臍血血漿中VWF蛋白量以及Cocl2(100umol/L)對傳代培養(yǎng)的臍靜脈內皮

3、細胞分泌VWF的影響。
　　【結果】
　　1.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組分娩前、分娩后第3天外周血和臍血血漿中VWF水平均明顯升高;與分娩前相比,兩組產(chǎn)后第3天血漿中VWF水平均無明顯改變(P>0.05);
　　2.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組胎盤和臍帶組織中內皮細胞VWF編碼基因轉錄水平均明顯升高(P<0.05);
　　3.與正常妊娠組比較,重度子癇前期組胎盤和臍帶組織內皮細胞內VWF蛋白水平無明顯差

4、異(P>0.05);
　　4.Cocl2(100umol/L)誘導細胞缺氧可以導致內皮細胞合成和分泌VWF增加,而細胞內VWF水平無明顯改變。
　　【結論】
　　1.重度子癇前期孕產(chǎn)婦外周血中VWF蛋白含量增加且分娩后第3天仍無明顯下降;胎盤和臍帶VWF表達和分泌增加;
　　2.Cocl2誘導內皮細胞缺氧可以導致內皮細胞表達和分泌VWF增加;
　　3.內皮細胞缺氧可能是子癇前期出現(xiàn)VWF表達和分泌增加的原因